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c-myc癌基因在人完全性葡萄胎和正常胎盘组织中的表达 张晓丽 高英茂 武玉玲 王富武 邴鲁军 李少玲 山东大学医学院组胚教研室 （250012） [摘要] 目的 研究c-myc基因与葡萄胎发生的关系。方法 取完全性葡萄胎和正常早孕流产标 本各30例,用SABC免疫组织化学染色, 检测c-myc基因在两种组织中的表达情况，并采用图像分 析技术，对正常早孕绒毛组和葡萄胎组c-myc的表达情况进行对比分析。结果 与正常绒毛相比， c-myc基因在葡萄胎组织中的表达量有明显不同。结论 c-myc癌基因与葡萄胎发生密切相关。 [关键词] c-myc基因 葡萄胎 胎盘绒毛 免疫组化 葡萄胎是在胚胎发生过程中，由于胎盘绒毛滋养细胞过度增殖而形成的一种病理变化，在 某些方面,其生物学行为与肿瘤非常相似, 而且在我国，其发生率明显高于欧美，因此研究某些 癌基因在其发生过程中的表达对阐明葡萄胎的发生机制有非 常重要的意义。本研究采用敏感性高、特异性强且操作快速简便的免疫组织化学SABC（Strept Abidin-Biotin Complex）方法，检测早期流产的正常胎盘绒毛和葡萄胎组织中c-myc基因的表 达情况，以探讨c-myc基因的表达状况与葡萄胎发生的相关性。 1． 材料和方法 1． 1材料来源 30例完全性葡萄胎均为临床首次清宫组织，孕龄为6-16周不等；同时收集6-12 周早孕人工流产绒毛标本10例作为对照。标本来源：山东医科大学附属医院、山东省立医院和 一些县、市级医院的妇产科病人，病理诊断为完全性葡萄胎。正常胎盘绒毛标本取自山东医科 大学附属医院计划生育门诊刮宫流产病例。 1．2 试剂：鼠抗人c-myc单克隆抗体及SABC免疫组化检测试剂盒购自武汉博士德生物技术有限 公司。 1．3 方法 所有标本经10％福尔马林固定，石蜡切片7um ，经二甲苯脱蜡，梯度酒精脱水，3 ％HO 封闭过氧化物酶，恒温箱96-100℃20分钟进行抗原修复。滴加0．0l M PH 7．4的PBS稀释 2 2 的c-myc一抗 （1：100）4℃孵育过夜，阴性对照组以0．0l M PH 7．4的PBS代替一抗。滴加0．0l M PH 7．4的PBS稀释的二抗37℃孵育30分钟，最后室温下 DAB显色，镜下控制显色时间，至阴 性对照将着色时为止。期间各步均以0．0l M PH 7．4的PBS洗涤3次，每次5分钟。梯度酒精脱 水，二甲苯透明，中性树胶封片。 1.4 显色结果判定：c-myc基因免疫组化阳性结果表现为滋养细胞胞浆呈棕黄色，阴性对照不显 色。用彩色图像分析系统对标本中阳性细胞进行定量分析：每张切片选10个高倍视野，每例共 测10个细胞的阳性信号灰度值。将图像分析所得数据用（均数±标准差）表示。 1.5 统计学处理:用spss统计软件进行方差分析,p值显著性取p0.05 -1- 2 结果 正常早孕胎盘绒毛及葡萄胎均有c—myc基因的阳性表达，定位于细胞浆，呈棕黄色颗粒状。 图1 正常绒毛c-myc免疫组化染色结果,示 图2 葡萄胎绒毛组织免疫组化染色结 绒毛染色深浅不一,浅染绒毛中细胞滋养 果,示细胞滋养层和间质呈阴性表达;合 层细胞着色稍深,间质阴性表达100× 体滋养层细胞呈强阳性表达,400× Fig1 immunohistochemical staining Fig2 immunohistochemical staining results of villi of hydatidiform results of no