硫化氢对低氧大鼠肺动脉超微结构的影响.pdfVIP

硫化氢对低氧大鼠肺动脉超微结构的影响 1 1 1 2 1 张春雨 ，陈晓波 ，金红芳 ，唐朝枢 ，杜军保 * 1.北京大学第一医院儿科，北京 100034 2 北京大学第一医院心血管研究所，教育部分子心血管病学重点实验室, 北京 100034 E-mail ： zhsprain@ 摘 要： 目的：探讨硫化氢（H S）对低氧大鼠肺动脉超微结构的影响。 方法：24 只雄性 2 Wistar大鼠随机分为对照组(n 8)、低氧组(n 8)和低氧+NaHS组(n 8)。以透射电镜观察肺 动脉超微结构，亚甲蓝分光光度法测定血浆H S含量。结果：低氧组大鼠血浆H S含量较对照 2 2 组降低 36%，电镜结果显示肺肌性动脉内皮细胞明显增生，平滑肌细胞体积增大、呈现合成 表型的改变。低氧＋NaHS组大鼠血浆H2S含量较低氧组升高 65%，肺肌性动脉的内皮细胞增 生程度缓解，平滑肌细胞呈现收缩表型。结论： H2S对低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞超 微结构具有明显的调节作用。 关键词：硫化氢，低氧，肺动脉，增殖 1.引 言 低氧性肺动脉高压 （hypoxic pulmonary hypertension ，HPH ）可由多种心肺血管性疾病而 引起，对心功能及气体交换构成重要影响,但至今为止其发生机理还不清楚。硫化氢 （hydrogen sulfide, H2S）过去一直被认为废气，近来发现它可由机体内源性产生。我们课题 组最近发现H S具有舒张血管平滑肌等重要的生物学作用，推测H S作为新型气体信号分子 2 2 参与心血管疾病的病理生理过程。本课题以HPH大鼠模型为研究对象，探讨H2S在HPH形成 中对肺动脉平滑肌细胞超微结构的影响，以其进一步揭示HPH 的形成机制。 2. 材料和方法 2.1. 大鼠低氧性肺动脉高压模型 选取体重 180-200g的健康雄性Wistar大鼠 24 只， 随机分为： 对照组(n=8)，低氧组(n=8)，低氧+NaHS组 (n=8)。将低氧组和低氧+NaHS组大鼠 置于常压低氧舱内(含 10.0%O , 90.0%N ，v/v)，每天连续低氧 6 小时，共21 天。对低氧+NaHS 2 2 组大鼠每天低氧前腹腔注射NaHS (14μmol/kg，溶于 0.5ml生理盐水中，每次临用前新鲜配 制)；低氧组及对照组大鼠腹腔注射等量生理盐水。 本课题得到高等学校博士学科点科研基金（项目编号：20020001063）资助 - 1 - 2.2 肺动脉超微结构观察 取大鼠左侧上叶肺组织，自外周部位切成 1mm ×1mm ×1mm 的组织块，经戊二醛和四氧化锇双固定，系列丙酮脱水，Epon812 包埋。半薄切片定位后， 选取与呼吸性细支气管伴行的小肺动脉行超薄切片，醋酸铀和枸橼酸铅双染色，以 JEM-100CXⅡ透射电子显微镜（日本 JEOL 公司）观察肺动脉超微结构的改变。 2.3 血浆H S含量测定 采用去蛋白的方法 ［1］。首先在试管中加入 0.5ml 1%醋酸锌，然 2 后加入 0.1ml血浆标本，振荡混匀，使血浆中的硫离子与醋酸锌充分反应形成硫化锌沉淀而 固定下来；再