果糖二磷酸钠及其制剂质量标准修订建议及研究方案.doc

附件一： 果糖二磷酸钠及其制剂质量标准修订建议与研究方案 1. 名称：由于原称“无水物”的果糖二磷酸钠含有不确定的结晶水与吸湿水，所以称“无水物”不确切，将原“无水物”称为“果糖-1,6-二磷酸三钠盐”。本品项下分为“果糖-1,6-二磷酸三钠盐”及“果糖-1,6-二磷酸三钠盐（八水合物）”。相关项目修改为： 【性状】本品为白色或类白色的结晶性粉末；微有特臭，味微咸；果糖-1,6-二磷酸三钠盐极具引湿性。 2. 红外光谱图：要求企业提供果糖二磷酸钠对照品及果糖二磷酸钠、注射用果糖二磷酸钠红外光吸收图谱并注明果糖-1,6-二磷酸三钠盐或果糖-1,6-二磷酸三钠盐八水合物。以比较含不同水分果糖二磷酸钠红外光谱图的差异。 3. 溶液的澄清度与颜色：建议企业采用以下两种测定方法进行考察、比较，并上报结果。 建议企业扫描供试品在300～450nm吸收光谱，并测定在420nm、430nm及350nm 波长处的吸光度。 ②按下述方法进行试验： 如显色，能否统一为与黄色（橙黄色或黄绿色）2号或3号、4号标准比色液比较（请注明供试品显色色调）。 果糖二磷酸钠： 溶液的澄清度与颜色 取本品1.5g（以无水物计算），加水10ml溶解后，溶液应澄清无色。如显色，与黄色、橙黄色或黄绿色2号标准比色液（中国药典2005年版二部附录ⅨA第一法）比较，不得更深。 注射用果糖二磷酸钠：（注明检测取样量一瓶为5.0g） 溶液的澄清度与颜色 取本品一瓶（5.0g），加水50ml溶解后，溶液应澄清无色。如显色，与黄色、橙黄色或黄绿色3号标准比色液（中国药典2005年版二部附录ⅨA第一法）比较，不得更深。 果糖二磷酸钠注射液： 颜色 本品与黄色、橙黄色或黄绿色3号标准比色液（中国药典2005年版二部附录ⅨA第一法）比较，不得更深。 果糖二磷酸钠口服溶液： 原标准为“吸光度 取本品，照紫外-可见分光光度法（中国药典2005年版二部附录ⅣA），在350nm波长处的吸光度不得大于0.5。” 由于口服液性状规定为无色至微黄色的澄清液体，建议口服液的“吸光度”改为“颜色”，以4号标准比色液比较。具体为： 颜色 本品与黄色、橙黄色或黄绿色4号标准比色液（中国药典2005年版二部附录ⅨA第一法）比较，不得更深。 4. 有关物质：将酶法测定6－磷酸果糖（F6P）和6－磷酸葡萄糖（G6P）与薄层色谱法进行有关物质（6-磷酸果糖、果糖）检查比较。建议直接采用薄层色谱法控制相关杂质。以下为薄层色谱法的参考方法，请各企业在此基础上增加对6-磷酸葡萄糖杂质的检查，并在系统适用性试验中增加最低检出量的考察。 有关物质 取本品，加水制成每1ml中含0.1g（以无水物计算）的溶液，作为供试品溶液；精密称取6-磷酸果糖对照品适量，加水制成每1ml中含0.5mg的溶液，作为对照品溶液（1）；精密称取果糖对照品适量，加水制成每1ml中含0.5mg的溶液，作为对照品溶液（2）；精密称取6－磷酸葡萄糖对照品适量，加水制成每1ml中含0.5mg的溶液，作为对照品溶液（3）；另取6-磷酸果糖对照品、果糖对照品、6－磷酸葡萄糖及供试品适量，加水制成每1ml中含6-磷酸果糖0.25mg、果糖0.25mg、6－磷酸葡萄糖0.25mg与供试品1mg的混合对照溶液。照薄层色谱法（中国药典2005年版二部附录ⅤB）试验，吸取混合对照溶液5μl，点于微晶纤维素薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水-丙酮-10%氨溶液（35：20：22.5：15：7.5）为展开剂，展开后晾干，喷以间苯二酚乙醇盐酸溶液（取间苯二酚0.5g，加80%乙醇溶液100ml使溶解，加盐酸5ml，摇匀）。在105℃加热5分钟，使显色，在色谱图中，应显示三个清晰分离的斑点。再精密吸取供试品溶液、对照品溶液（1）、（2）与（3）各5μl，分别点于同一微晶纤维素薄层板上，照上述色谱条件试验。供试品溶液如显杂质斑点，不得多于3个，并分别应与对照品溶液（1）、（2）与（3）主斑点的位置相同，其斑点颜色与相应的对照品溶液主斑点比较，均不得更深（各0.5％）。 附：6－磷酸果糖（F6P）和6－磷酸葡萄糖（G6P）酶法含量测定方法 6－磷酸果糖（F6P）和6－磷酸葡萄糖（G6P） 6－磷酸葡萄糖（C6H12O6）和6－磷酸果糖（C6H12O6）含量总和不得过2.0％。 供试品溶液的制备 取本品5g ，精密称定，置50ml 量瓶中，加随样双蒸水稀释至刻度，摇匀。取上述溶液5.0ml ，置25ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。 试剂的制备 盐酸三乙醇胺缓冲液（0.4mol/L ，pH7.60）：取盐酸三乙醇胺18.6g，加水200ml 溶解，加3.7g 乙二胺四乙酸二钠，用2mol/L 氢氧化钠调节pH至7.60，加水稀释至250ml。4℃保存，可稳定保存一周。 3.2