第五章微生物的生长繁殖与生存因子第四节.ppt

第四节 微生物与微生物之间的关系 一、竞争关系 二、原始合作关系 三、共生关系 四、偏害关系 五、捕食关系 六、寄生关系 一、竞争关系 二、原始合作关系 三、共生关系 四、偏害关系 五、捕食关系 捕食关系即一种微生物以另一种微生物为食。 六、寄生关系 第五节 菌种的退化、复壮与保藏 一、菌种的退化和复壮 二、菌种的保藏 * 环 境 微 生 物 学 Zhejiang Ocean University 物种1 物种2 时间 数 量 竞争关系是指不同的微生物种群在同一环境中，对食物等营养、溶解氧、空间和其它共同要求的物质互相竞争，互相受到不利的影响。 如好氧生物处理中对氧的竞争。 原始合作关系（或互生关系）是指两种可以单独生活的生物共存于同一环境中，相互提供营养及其它生活条件，双方互为有利，当两者分开时各自可单独生存。 固氮菌和纤维素分解菌的互生关系 氨化细菌、亚硝化细菌、硝化细菌 氧化塘中的细菌与藻类之间的原始合作关系 好 氧 塘 物种1 物种2 时间 数 量 共生关系是指两种不能单独生活的微生物共同生活于同一环境中，各自执行优势的生理功能，在营养上互为有利，组成共生体。 如地衣是藻类与真菌形成的共生体。 偏害关系（或拮抗关系）是指共存于同一环境中两种微生物，甲方对乙方有害，乙方对甲方无任何影响。 偏害关系可分为非特异性偏害和特异性偏害。 非特异性偏害：乳酸菌产生乳酸使pH下降 特异性偏害：青霉素产生青霉对革兰氏阳性菌有致死作用。 时间 数 量 物种1 物种2 时间 数 量 寄主 寄生菌 寄生关系是指一种生物需要在另一种生物体内生活，从中摄取营养才能生长繁殖。前者为寄生菌，后者为寄主。 有的寄生菌不能离开寄主而生存，叫专性寄生 有的寄生菌离开寄主后能营腐生生活叫兼性寄生 寄生的结果一般引起寄主损伤或死亡。 一、菌种的退化和复壮 二、菌种的保藏 微生物由于负变（变异）而导致菌种退化。可采取相应的措施使退化菌株复壮。 一、纯种分离 二、通过寄主复壮 三、联合复壮 稀释倒平板法(pour plate method) 涂布平板法(spread plate method) 平板划线分离法(streak plate method) 稀释摇管法(dilution shake culture method) 稀释倒平板法待分离的材料用无菌水作一系列的稀释，取不同稀释液少许，与已熔化并冷却至50℃左右的琼脂培养基混合，摇匀后，倾入灭过菌的培养皿中，待琼脂凝固后，制成可能含菌的琼脂平板，保温培养一定时间，可能出现在平板表面或琼脂培养基中的单个菌落，这个菌落可能就是由一个细菌细胞繁殖形成的。随后挑取该单个菌落，或重复以上操作数次，便可得到纯培养。 The method of a serial dilutions for viable counting 涂布平板法 在微生物学研究中更常用的纯种分离方法是涂布平板法。其做法是先将已熔化的培养基倒人无菌平皿，制成无菌平板，冷却凝固后，将一定量的某一稀释度的样品悬液滴加在平板表面，再用无菌玻璃涂棒将菌液均匀分散至整个平板表面，经培养后挑取单个菌落。 Pour plate Pour plate Pour plate Pour plate 平板划线分离法 用接种环以无菌操作沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。 Aseptic technique Streak plate 稀释摇管法 对于那些对氧气更为敏感的厌氧性微生物，纯培养的分离则可采用稀释摇管培养法进行。 将一系列盛无菌琼脂培养基的试管加热使琼脂熔化后，冷却并保持在50℃左右，用这些试管进行梯度稀释待分离材料，试管均匀，冷凝，倾注一层灭菌液体石蜡和固体石蜡的混合物，将培养基和空气隔开。培养后，菌落形成在琼脂柱的中间，挑取和移植单菌落。 菌种保藏的方法有： 一、定期移植法 二、干燥法 三、隔绝空气法 四、蒸馏水悬浮法 五、综合法 通过分离纯化得到的微生物纯培养物，必须通过各种保藏技术使其在一定时间内不死亡，不会被其他微生物污染，不会因发生变异而丢失重要的生物学性状，否则就无法真正保证微生物研究和应用工作的顺利进行。 菌种或培养物保藏是一项最重要的微生物学基础工作，微生物菌种是珍贵的自然资源，具有重要意义。 菌种保藏 就是根据菌种特性及保藏目的的不同，给微生物菌株以特定的条件，使其存活而得以延续。 菌种保藏机构：中国微生物菌种保藏委员会(CCCCM)，