胶原的提取研究与应用.doc

PAGE PAGE 5胶原的提取研究与应用摘　要:本文简要介绍了动物皮胶原的结构组成和物化性质，由于其独特的理化性质和优良的生物相容性，在许多领域得到了广泛应用。着重综述了最近几年国内外从猪皮、牛皮和鱼皮中提取胶原的工艺方法。关键词:胶原；应用；猪皮；牛皮；鱼皮；提取Research and Application on Extraction of CollagensAbstract: The structures and characteristics of collagen of animal skins are briefly introduced. Collagen has gained application in various fields for its unique physiochemical property and excellent biocompatibility. Based on that, some recent technologies and methods on extraction of collagens from pig skin, calf skin and fish skin are introduced.Keywords: Collagen; application; pig skin; calf skin; fish skin; extraction1 前言胶原是生物体内一种纤维蛋白，主要存在于皮肤、骨、软骨及肌腱等组织中，占人体或其他动物体总蛋白含量的25%-30%。胶原蛋白因其优良的生物学特性而广泛地应用于生物医用材料领域，因此，如何进行高纯度、高产率的具有生物活性的胶原的提取一直是广大研究者关注的课题。从猪皮和牛皮中提取胶原的历史比较悠久，并且由于其原料充足，至今仍然是皮胶原的主要来源。2 皮胶原的结构与性质来源于动物皮的胶原一般统称为皮胶原，其主要组成为 = 1 \* ROMAN I型胶原和 = 3 \* ROMAN III型胶原，它们都属于成纤维胶原[1]。成纤维胶原因其化学组成、交联和螺旋结构的特点而具有较强的机械性能、低免疫原性、较好的生物相容性和可生物降解性等生物学特性，使其在生物医用材料方面的广泛应用成为可能，如可用作人工皮肤、可降解缝合线、药物载体等，甚至胶原海绵作为生物敷料可追溯到20世纪30年代[2]。2.1 = 1 \* ROMAN I型胶原的结构 = 1 \* ROMAN I型胶原是含量最多研究最透彻的胶原，占生物体胶原总量的90%左右。 = 1 \* ROMAN I型胶原一般为白色、透明、无分支的原纤维，是由两条相同的α1( = 1 \* ROMAN I)链和一条α2( = 1 \* ROMAN I)链组成的异质胶原(HeterotypicCol2lagen)[3]，每条肽链的相对分子质量约为100000，由1052个氨基酸残基组成，直径约1.5nm，长300nm[4]，α1( = 1 \* ROMAN I)和α2( = 1 \* ROMAN I)肽链的螺旋区含有338个(Gly-X-Y)重复序列，X常为脯氨酸，Y常为羟脯氨酸或羟赖氨酸。因此，甘氨酸约占1/3，脯氨酸和羟脯氨酸占1/5以上，还有大量的羟赖氨酸和丙氨酸。A链中吡咯环的存在使N-C键不能自由旋转，构成左手螺旋，螺距为0.87nm，每转一圈约有3.3个氨基酸残基[5]。三条α链依靠侧链残基相连，最小氨基酸甘氨酸残基位于三股螺旋内侧，螺距为96nm，每圈有36个氨基酸残基，形成了原胶原(tropocollagen)分子特有的三股螺旋结构。肽链中酸性和碱性氨基酸大都集中分布在一定的区段，使得肽链上交替出现着极性和非极性氨基酸区域。两分子可以通过极性区和非极性区的静电引力彼此聚合，处于同一轴线上的前后两个原胶原分子保持一定的距离，形成了胶原原纤维的疏区和密区，透射电镜观察可见Ⅰ型胶原的原纤维呈现67nm的周期性横纹(称为D周期)，一个Ⅰ型胶原分子约长4.4个D周期，分子间的间隙为0.6D[6]。2.2　Ⅲ型胶原的结构Ⅲ型胶原是人体组织中含量位居第二的胶原蛋白，往往伴随着型胶原的出现而出现[7]，是构成腔状组织(如肺、肝、真皮、脾和血管等)网状纤维的重要组成部分，其分子由α1(Ⅲ)链组成的同质三体(homotrimer)，由1029个氨基酸残基组成[8]，长300nm，具有类似于型胶原的四级结构。α1(链的三条螺旋链的C末端部位氨基酸序列为Gly-Ala-Pro-Gly-Pro-Cys-Cys，两个半胱氨酸在三条α链间形成二硫键结合[9]。2.3　物理化学性质2.3.1收缩温度(Shrinkage temperature)在水溶液中引起胶原湿热收缩变性的温度称为收缩温度。一般来讲，陆生