壳聚糖复合支架材料的体外细胞相容性评价.pdfVIP

第 28卷 第 2期 应 用 化 学 V01．28Iss．2 2011年 2月 CHINESE JOURNALOFAPPLIED CHEMISTRY Feb．20l1 三维多孔碳纤维／聚乳酸／壳聚糖复合支架材料的 体外细胞相容性评价 徐文峰。 廖晓玲 (。重庆文理学院化学与环境工程学院 重庆402160；重庆科技学院冶金与材料工程学院 重庆401331) 摘 要 利用溶液共混法以及冷冻干燥法制备了三维多孔碳纤维／聚乳酸／壳聚糖 (CF／PLA／CS)复合生物支 架材料，通过相差显微镜和扫描电子显微镜检测了鼠骨髓基质细胞(BMSCs)与该材料的生物相容性，得到了 MTI生长曲线，评价了材料的毒性。结果表明，以实验组材料的浸提液培养细胞 ，8d后细胞开始连片生长，没 有观察到细胞变形、坏死现象；在实验组材料上培养4d后细胞的SEM图像显示，细胞形貌正常，并已开始向 孔隙深部生长；MTF法绘制的增值曲线表明，培养4d后实验组的细胞增殖速度高出空白对照组30％。以上 细胞形态学观察法和细胞增殖法评价结果表明，三维多孔 CF／PLA／CS复合材料没有细胞毒性，并对细胞有 良好的粘附、增殖能力，有望成为骨修复材料。 关键词 三维，CF／PLA／CS复合材料 ，生物体外测试，细胞相容性 中图分类号：0636．1 文献标识码：A 文章编号：1000-0518(2011)02-0214-05 DOI：10．3724／SP．J．1095．2011．00220 近年来，组织工程支架材料已成为硬组织缺损与修复的研究热点，其中，聚乳酸 (PLA)与壳聚糖 (cs)已被广泛用作组织工程支架材料、手术缝合线和药物载体材料等 1-2]。PLA具有 良好的生物相容 性和生物降解性，但存在降解酸性过大易引起体 内炎症，以及机械性能差的缺点。cs分子结构类似细 胞外基质成分氨基多糖，具有能促进伤口和骨折愈合、抗溃疡和杀菌等 良好的生物活性，但同样存在机 械性能差的缺点。碳纤维 (CF)具有高强、高模的特性，同时具有很好的生物相容性 。本文采用溶液共 混法以及冷冻干燥法 刮制备了多孔的碳纤维／聚乳酸／壳聚糖 (CF／PLA／CS)三元复合生物支架材料 (3DCF／PLA／CS)，与PLA单一或二元类似材料相比 j，CF与cs的加入克服了PLA机械强度低以及 降解酸性过大等缺点，该复合材料具有组分设计和工艺制造的综合创新性。并选择鼠骨髓基质细胞 (bonemarrowstromalcells，BMSCs)作为细胞模型，检测三维多孔CF／PLA／CS复合支架材料的细胞生物 学响应，为骨组织工程中生物材料的选择提供实验依据。 1 实验部分 1．1 试剂和仪器 聚乳酸(PLA)：分子量8×10；壳聚糖(cs)：分子量2×10，食品级，脱乙酰度75％～85％；乙酸乙 酯：分析纯；T300碳纤维 (日本东丽公司)： 7～10 m，P：1．78r／cm ；磷酸缓冲液(PBS)：0．1mol／L， pH=7．4；达尔伯克(氏)改良伊格尔(氏)培养基 F12(DMEM／F12)：500mL／L；四甲基偶氮唑蓝 (MTr) 溶液：5g／L；二甲基亚砜(DMSO)：分析纯。 IJG．18型冷冻干燥机；AS系列超声波清洗器；雷磁JB一1A搅拌器；电子天平；BDS200一PH型倒置相 差显微镜；KWN13-qo7×40一XYL型高温管式气氛电阻炉；GHP-9050型数显隔水恒温培养箱；$3400N型 扫描电子显微镜 (日本 日立)；Model550型酶标仪 (美国Bio-Rad公司)。 2010--04—15收稿 ，2010-06-29修回 国家 自然科学基金、重庆市教委 自然科学基金 (KJ081205，KJ091213)资助项 目 通讯联系人：廖晓玲，教授；Tel：023E．mail：zxc_228@163．con；研究方向：生物组织工程材料 第2期 徐文峰等：三维多孔碳纤维／聚乳酸／壳聚糖复合支架材料的体外细胞相容性评价 215 1．2 碳纤维的分散 将碳纤维在高温管式气氛电阻炉