环介导扩增与石英晶体微天平快速检测核酸.pdfVIP

第25卷第5期 化 学 研 究 与 应 用 Vo1．25．No．5 2013年5月 ChemicalResearchandApplication May，2013 文章编号 ：1004—1656(2013)05-0748-03 环介导扩增与石英晶体微天平快速检测核酸 李燕¨、、国— (河南省化工研究所有限责任公司，河南 郑州 450052) 摘要：建立环介导恒温扩增 (LAMP)一石英晶体微天平 (QCM)原位快速检测核酸的方法。将环介导恒温核酸 扩增(LAMP)技术与石英晶体微天平 (QCM)技术相结合 ，采用巯基化试剂分子组装方法，将 LAMP反应体系 中的4个引物之一固定于QCM 电极上 ，在安装所述 电极的QCM检测池中配置LAMP反应体系并进行环介导 恒温核酸扩增，用 QCM仪器在线原位检测频率变化，判断ALMP反应是否发生 ，进而判断体系中是否存在 目 标核酸特异基因。该方法检测核酸特异性强、灵敏度高，并且操作简便，有望发展成为快速筛查检测核酸的有 效手段。 关键词 ：核酸；环介导恒温核酸扩增 (ALMP)；石英晶体微天平(QCM)；检测 中图分类号：0657．99 文献标志码：A Establishmentofloop-mediatedisothermalamplification(LAMP)combined withquartzcrystalmicrobalance(QCM)forthedetectionofanucleicacid LIYa—guo (HenanInstituteofChemicalEngineeringCo．，Ltd．，Zhengzhou，450052China) Abstract：Theobjectiveofthestudyistodevelopaloop—mediatedisothermalamplification(LAMP)-quartzcrystalmicrobalance (QCM)methodforrapiddetectionofanucleicacid．Thequartzcrystalmicrobalance(QCM)combinedwiththeloop—mediatediso— thermalamplification(LAMP)technology．Usethethiolreagentmoleculesassemblymethodtofixoneofthefourprimersintheloop— mediatedisothermalamplificationreactionsystemontheQCMelectrode，andestablishtheLAMPreactionsystemintheQCMdetec— tionpoolwhichthedescribedelectrodeinstalledtoproceedloop—mediatedisothemralamplification．WeuseQCMinstrumenttotest frequencychangesonlineanddeterminewhethertheLAMPreactionoccurs，therebyjudgingifthenucleicacidexistinthesys— tern．Th eseresultssuggestedthatdetectionofnucleicacidbythismethodisaneffectivewithhighspecificityandsensitivity．This assayisexpectedtobecomeavaluabletoolofrrapiddetectionandidentificationofnucleicacid． Keywords：nucleicacid；loop—mediatedisothemralamplification；quartzcrystalmicrobalance(QCM)；detection 核酸是生物遗传的物质基础，与