色谱分析法PPT课件课件.pptVIP

* 题 解 （2）柱的平均塔板数 n = 16 (tR/Wb )2 =16 (16.40 /1.11)2 = 3493 n = 16 (tR/Wb )2 =16 (17.63 /1.21)2 = 3397 n平均 = （3493 + 3397）/ 2 = 3445 解 ：（1）柱的分离度 * ２、分离度与柱效能，选择性的关系 柱效能—指色谱柱在分离过程中的分离效能，常用n，Ｈ来描述，n 越大，Ｈ越小，柱效越高，对单个组分而言。 　 对多个组分的分离来说，无法用n ,H 来描述，n 大，Ｈ小，几个峰未必分的开。 选择性—描述两个相邻组分在同一固定相中热力学分布行为的重要参数，用r2,1相对保留值表示. r2,1越大，保留时间相差大，分离越好（但未考虑峰宽因素） * ２、分离度与柱效能，选择性的关系 * ∵n = 5.54 (tR /W1/2)2=16 (tR/Wb )2 ２、分离度与柱效能，选择性的关系 ∴ * r2,1 ，k，N∶如何控制分辨率? r2,1 * a:柱效项：塔板数决定，n 越大，柱效越高分离的越好。若通过增加柱长来增加 n,tR会增大，降低板高才是增大R最好的办法 ２、分离度与柱效能，选择性的关系 b：选择性项：r2,1的微小变化，使分离度有较大改善， r2,1越大，tR’（２）与t’R（1）相差越大，分的越好。 r2,1=1的两组分无法分离。 C：柱容量项：k大一些对分析有利; 太大，tR长，柱容量合适,分的才好。一般１＜k＜１０（2-7) * 以n有效表示，则有： * 例 题： 在一定条件下,两个组分的调整保留时间分别为85秒和100秒,要达到完全分离，即R=1.5。计算需要多少块有效塔板?若填充柱的塔板高度为0.1 cm, 柱长是多少? L有效 = n有效·H有效 = 1547×0.1 = 155 cm 即柱长为1.55米时，两组分可以得到完全分离。 解： r2,1= 100 / 85 = 1.18 * §4 色谱定性和定量分析 一、定性分析 定性分析的任务是确定色谱图上各个峰代表什么物质。 1.利用保留值与已知物对照定性 （1）利用保留时间定性 在相同色谱条件下，将标准物和样品分别进样，两者保留值相同，可能为同一物质。 此方法要求操作条件稳定、一致，必须严格控制操作条件，尤其是流速。 * * （2）利用峰高增量定性 若样品复杂，流出峰距离太近，或操作条件不易控制，可将已知物加到样品中，混合进样，若被测组分峰高增加了，则可能含该已知物。 （3）利用双色谱系统定性 通过改变色谱条件来改变分离选择性，使不同物质显示不同保留值。例：选用极性差别较大的两种不同固定液来制备色谱柱，不同物质具有不同保留值。 2. 利用保留值经验规律定性（气相） 3. 根据文献保留值数据定性（气相） * 4.与其它分析仪器联用的定性方法 小型化的台式色质联用仪（GC-MS；LC-MS） 色谱-红外光谱仪联用仪； 组分的结构鉴定 Sample Sample 5890 1.0 DEG/MIN HEWLETT PACKARD HEWLETT PACKARD 5972A Mass Selective Detector D C B A A B C D Gas Chromatograph (GC) Mass Spectrometer (MS) Separation Identification B A C D * 二、定量分析 气相色谱定量分析是根据检测器对溶质产生的响应信号与溶质的量成正比的原理，通过色谱图上的峰面积或峰高，计算样品中溶质的含量。 mi=fi Ai mi=fihi mi—被测组分i的质量，fi—比例系数 Ai、hi—被测组分的峰面积及峰高 A=1. 065×h×W1／2 A=1.065×h （W0.15＋W0.85）/2 * 1、定量校正因子 色谱定量分析是基于峰面积与组分的量成正比关系。 但由于同一检测器对不同物质具有不同的响应值，即不同物质检测器的灵敏度不同，相同的峰面积并不意味着有相等的量。 定量校正因子：单位峰面积对应组分的质量。 fi=mi/Ai fi绝对校正因子 (1)绝对校正因子 绝对校正因子受操作条件影响较大，要严格控制色谱条件，不易准确测定，没有统一标准，无法直接引用，定量分析中采用相对较正因子。