细胞培养4：细胞分离与纯化和细胞系、细胞克隆.pptVIP

（4）饲养细胞（feeder cell） 在体外培养时，单个细胞和密度极低的分散细胞很难存活和增殖，使用饲养细胞有利于克隆的形成。 饲养细胞也称滋养细胞，是一层经过射线照射伤害处理的、供其它细胞附着的细胞层。饲养细胞受射线照射后，失去分裂能力，但仍存活并有同化营养液的能力，被作克隆的细胞散落在饲养细胞上层与之接触后，饲养细胞能促进克隆细胞的生长。细胞克隆形成后，饲养细胞渐死亡，换液时可被清除。 ２、影响克隆形成率的因素 五、细胞系（株）和细胞克隆 （二）细胞克隆（cell cloning） （5）激素和生长因子 一些激素和生长因子可促进细胞克隆的形成。 例如，培养液中含1～10 IU/ml的胰岛素能促进很多种细胞克隆的形成。地塞米松也能提高人正常胶质细胞、胶质瘤细胞、成纤维细胞、黑色素瘤细胞等的克隆形成率。表皮生长因子可促进角质细胞、成纤维细胞和软骨细胞等生长，推荐使用浓度为1～20 ng／ml。 ２、影响克隆形成率的因素 五、细胞系（株）和细胞克隆 （二）细胞克隆（cell cloning） （6）CO2 CO2对绝大多数细胞克隆形成率都有提高作用，常用5％浓度。 对有的细胞，如人成纤维细胞和胶质细胞克隆时，2%的CO2效果可能更好。 HEPES ( 20 mmol/L）与2%的CO2配合使用能保护细胞免受培养液pH值波动的影响。 ２、影响克隆形成率的因素 五、细胞系