一个ZM401基因家族新成员（ZM908）的克隆及其功能研究.pdfVIP

摘 要 在过去四年中，人们发现具有潜在非编码的RNA转录物数目近乎爆炸性的增长。从目前研 究来看，非编码蛋白质RNA(ncRNA)与蛋白质同等重要，它们也在细胞中起着重要的生理生化功 能。 本研究从以ZM40lcDNA片段为探针，在玉米基因组文库中筛选出的阳性噬菌体克隆入手， 采用亚克隆的方法，从其中一个908阳性噬菌体中获得了1822bp的序列。基因分析显示这段序 明显的开放阅读框架，序列中最长可能的开放阅读框架仅编码98个氨基酸，具有polyCA)尾部结 构，RNA分子具有稳定的二级结构，符合非编码RNA基因的特点，可能属于类似丁mRNA的 玉米基因组中。 载体，经农杆菌介导，转化烟草和拟南芥。经PCR检测，得到TO代正向和反向转基因烟草为30 株和4株；T2代正向和反向转基因拟南芥植株为14株和6株。对转正向ZM908基因烟草观察发 现：花序生长缓慢，在生长过程中有脱落的现象发生；花粉呈黄褐色，大小不一致，并且萌发率 很低，而ZM908基因以反向方式整合的转基因烟草表现一切正常。对转基因拟南芥表型观察显 示，转正向ZM908基因的拟南芥与非转基因的没有差别，花粉的扫描电镜观察显示转基因花粉 除略有些凹陷外没有明显变化，但是花粉萌发率很低，只有正常花粉萌发率的四分之一，而转反 向ZM908基因拟南芥表现一切正常。这些结果说明ZM908在花粉发育过程中起重要作用。 Abstract The four haveSeenan inthenumberofdetectedRNA withno past years explosion transcriptsapparent hasledto that be protein—codingpotential．Thisspeculmionnon-protein·coding as as inthe ofvitalcellularfunctions． importantproteinsregulation This was basedonson]e screenedfromthe ofmaize studybeginning positive^phages genomiclibrary thelabeledZM401eDNA as 1 was fragmentprobe．By sequence byusing subcloning，an822bp from obtainedoneofthe contains215 asZM908．Biosofiware positive^phages．Itbp．named anlysis thatZM908 tothemRNA--like RNAwhichis suggests geneproperlybelongs non--codinggene purposed to‘lackofobvious contains98 and openreadingframe(thelongestpossibly AA)，containpoly(A)tale havestableRNAstructureinvivo．ZM908contains nucleotide withZM401 hi曲conservedsequence and in conserv