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实习一? 食品的微生物学检验
实验目的:了解食品微生物检验的过程,常用指标及检验结果评价。
实验内容:
(一)细菌总数的测定
1 定义:细菌总数是指1g或lml食品,经过处理,在pH7.4~7.6的普通营养琼脂平板上,35~370C培养24土2小时生长出来的细菌菌落总数。
2.实验试剂(1)琼脂? (2)生理盐水? (3)蛋白陈(4)牛肉膏? (5)氯化钠
3.实验仪器:1)采样瓶(2)平皿?????? (3)吸管? (4)试管?? (5)孵箱
4.操作方法
(1)样品的采集与处理:
在采样和样品处理时,必须严格遵守无菌原则,采样后尽快检验。样品在室温下放
置最好不超过2小时,否则应置于冰箱内,在冰箱放置最长也不要超过12小时。
A 肉与肉制品的采集及处理:
(1)样品的采集
①生肉与内脏:如系屠宰场的猪,可于开腔后立即用灭菌刀采取两腿内侧肌肉509
左右;如果是鲜肉和冻肉,可用灭菌刀采取腿肉或其它部位肌肉5吨左右;,如系脾、??????? 肾,可取其全部;如系肝脏,则取靠近肝门带有淋巴结部分。样品采后用无菌镊子夹入灭菌玻璃容器或塑料袋内立即送检,样品内不得放人任何防腐剂。
②熟肉及灌肠类:一般可取有代表性样品30~50克,肥瘦共存的肉,宜取瘦的,肥瘦难分或量不多时,要随机取样,灌肠类横断采样3~5块,样品取后放入灭菌容器内立即送检。
(b)样品处理。
凡由大块样品中采取一部分,,一般均须在表面,以一烙板灭菌或沸水进行表面灭菌。再??????? 用灭菌剪子剪掉表面部分,在无菌条件下,取深层肌肉或内脏10g放人灭菌容器内,用??????? 灭菌剪子剪碎,加入灭菌河沙和灭菌生理盐水100ml研磨混匀制成1:10混悬液。熟肉及??????? 灌肠也可不用表面灭菌处理,而直接用无菌操作称取10g放入灭菌容器内研磨或剪碎,再按上法制成1:10混悬液。
b.乳与乳制品(鲜乳、炼乳、奶粉、酸奶等)。
(a)样品的采集
1.鲜乳:如在畜牧场直接取样,先将牛乳头用酒精棉球表面擦拭消毒,弃去开始挤下的头两把奶,然后再用灭菌容器接取,同一头牛应在各乳头上各取一部分。如在奶站或销售点,可用灭菌采样器采取不同部位有代表性的样品,采后不加防腐剂,立即送检。若为同一批瓶装奶则随机取2~5瓶送检。
2.乳制品。最好采取原装样品,如无原装者,要用灭菌容器取不同部位有代表性的样品送检。
(b)样品处理:
1.???? 鲜乳:以无菌操作,直接用吸管取10ml加入90ml生理盐水作成1: 10稀释液(需用原液者例外)。
2.???? 奶粉:无菌称取10g样品,放入预温至450C的生理盐水90m1,溶后混匀制成1: 10稀释液。
3.???? 炼乳、酸乳:将瓶口或铁筒的表面用点燃的酒精棉球消毒,然后用石炭酸纱布盖好,再用灭菌开罐器开封,无菌称取10g样品放入灭菌容器内,加灭菌生理盐水90ml振摇均匀,制成1:10稀释液。
4.???? 奶油;将块状样品用灭菌刀取10g,加90ml生理盐水,放入450C 水浴中熔化,摇匀制成1:10稀释液。
C.蛋品:?
(a)样品采集:
? 鲜蛋:取完整的鲜蛋放入无菌袋内送检。
? 干全蛋,于蛋黄和干蛋白:将包装箱开口处用75%酒精棉球消毒后打开,用无菌采样器斜角插入箱底,使样品填满采样器,抽出采样器,用灭菌匙分上、。中、下各取? 50g装人250ml广口瓶,混匀,送检。
?冰蛋:如生产过程中,每半小时取样一次,每次约200g,如是冷藏品,需用无菌钻头钻取,放人无菌容器内送检。
(b) 样品处理:
①?鲜蛋:用肥皂水将蛋壳洗净后,放入0.1%升汞溶液浸泡10分钟,然后用灭菌棉花擦干,表面覆盖消毒纱布。在打开蛋壳前,先用3%碘酒悄毒,再用灭菌刀敲破使蛋液流入事??? 先灭菌过的装有玻璃珠的三角瓶内,充分振摇使其混合均匀。无菌操作称取109放人事先灭菌过的装有玻璃珠的三角瓶内,并加90ml灭菌生理盐水,混匀。
②?干全蛋、干蛋黄、干蛋白:按无菌操作称取10克放入灭菌容器内,加90ml生理盐水混合均匀。
③???? 冰蛋:冷冻的冰蛋需放入流动的冷水盆内,待熔后用无菌操作称取10g放入事先灭菌过的装有玻璃珠的三角瓶内,加90ml生理盐水并振摇混匀。
?d、清凉饮料:
(a)样品的采集:瓶装汽水、果子露、果味水、鲜果汁水、酸梅汤等,应采原包装样品送检。冰激淋、刨冰等样品按无菌操作采集后放入灭菌容器内,再置于冰壶或隔热容器中送检。冰棍采取原包装放入灭菌容器中送检。
(b)样品处理:
①汽水、果子露、鲜果汁和酸梅汤等
? 用点燃的酒精棉球烧灼瓶口消毒。用石碳酸纱布盖好,再开启瓶盖,并迅速换一灭??????? 菌棉塞轻轻振摇待气体全部逸出后,进行检验。
②冰棍用无菌镊子,除去包装纸,再用灭菌剪子剪掉木棒使样品落入事先灭菌的500ml广口瓶内,
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