乳酸菌的分类鉴定.ppt

乳酸菌的分类鉴定 时间：2013年11月 乳酸菌 目前发 现乳酸菌主要有包括 乳杆菌属（Lactobacillus ）、 链球菌属（Streptococeus）、 明串珠菌属（Leuconostoc）、 双歧杆菌属（Bifidobacterium）、 片球菌属（Pediococcus） 等在内的至少 23 个属。 每个属下面又发现若干个菌种，菌种下面还有若干亚种，属于革兰氏阳性菌 乳酸菌鉴定方法 有表型鉴定法（经典方法）和分子标记鉴定法。 表型鉴定法操作方便、成本低，但不能反应乳酸菌的遗传性信息； 分子标记法快速，但成本相对较高，而且测定的结果与前两者有不一致的现象。 所以不能只用一种方法对乳酸菌进行鉴定与分类，几种方法结合起来综合判断可能更加准确。 一、表型鉴定：两歧法 二、分子水平： 基于PCR的DNA指纹图谱技术 基于rRNA序列的分子标记技术 种间特异性PCR 一、生化鉴定：两歧法 鉴定对象株 ↓共通项目：共16项 实验结果记录 ↓ 属间鉴定项目（定属） ↓ 种间鉴定项目 ↙ ↘ 判定种 不能判定种 不能判定种 ↓ 重复种的鉴定（n1） ↓ 追加试验项目(耐盐性试验、精氨酸产气、肽聚糖类型) ↓ ↘ 判定种 重复种的鉴定（n2,n1n2） ↓ 肽聚糖类型、GC%测定 ↓ ↘ 判定种 重复种的鉴定 ↓ DNA同源性 ↓ 判定种 共通项目（16项）： 1.生长状态观察 2.革兰氏染色 3.细胞的形态观察 4.H2O2酶试验 5.硝酸盐还原试验 6.石蕊牛乳试验 7.明胶液化试验 8.运动性试验 9.葡萄糖产气试验 10.pH生长试验 11.温度生长试验 12.糖发酵试验 13.发酵蔗糖产葡聚糖 14.发酵类型 15.乳酸旋光性 16.细胞壁中肽聚糖类型 17.精氨酸产气 18.耐盐性、好盐性试验 标准菌株: 各种生化特性已研究清楚的标准菌株，可用于检测试验的准确性和可靠性。 分离菌株（G+杆菌） ↙ ↘ 过氧化氢酶（-） 过氧化氢酶（+） ↙ ↘ ↓ 芽孢（+） 芽孢（-） 非乳酸菌 ↓ ↙ ↘ Sporolactobacillus 同型发酵 异型发酵 ↓ ↓ Lactobacillus Lactobacillus