第四节真核生物RNA合成.ppt

* 第四节 真核生物RNA的合成 一、真核生物RNA聚合酶 真核细胞中有三种RNA聚合酶，即RNA聚合酶Ⅰ，RNA聚合酶Ⅱ，RNA聚合酶Ⅲ。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的区别主要在于对鹅膏蕈碱的敏感性。 一种毒菌类鬼笔鹅膏所生成的具有双环结构的八肽毒素。 对动物的致死作用是：在真核细胞核内催化合成mRNA时，抑制磷酸二酯键的形成。 1、RNA聚合酶Ⅰ RNA聚合酶Ⅰ基本不受鹅膏蕈碱的抑制，只有在大于 10-3 mol/L浓度时才表现出轻微的抑制。存在于核仁中，其功能是合成5.8S rRNA，18S rRNA和28S rRNA，从而构成真核生物核糖体的大小亚基。 2、RNA聚合酶Ⅱ RNA聚合酶Ⅱ对鹅膏蕈碱最为敏感，在10-9～ 10-8 mol/L浓度时就会被抑制，存在于核质中，其功能是合成mRNA。 3、RNA聚合酶Ⅲ RNA聚合酶Ⅲ对鹅膏蕈碱的敏感介于酶Ⅰ与酶Ⅱ之间。在10-5 ～ 10-4 mol/L浓度时表现出抑制作用。存在于核质中，功能是合成 tRNA。 二、真核生物的启动子 真核生物有3种RNA聚合酶，每种酶都有自己的启动子。 1、RNA聚合酶Ⅰ的启动子 RNA聚合酶Ⅰ是转录rRNA的，其启动子分为： 近启动子：合成起点前40bp到合成起点5bp处，- 40 ～ +5 功能是决定转录起始的精确位置。 远启动子：- 165 ～ -40 功能是影响转录的频率。 2、RNA聚合酶Ⅱ的启动子 真核生物RNA聚合酶Ⅱ是转录mRNA的，其启动子是多部位结构，主要有以下4个部位： 第一个部位是帽子位点，即转录起始点。 第二个部位是TATA盒，共有序列为TATAAAA (-30区) 第三个部位是CAAT盒，共有序列为GGTCAATCT (-80区) 第四个部位是增强子，又称为远上游序列，一般都在-100区以上。 -30 3、RNA聚合酶Ⅲ的启动子 RNA聚合酶Ⅲ是转录tRNA的，其启动子在转录起始位点的下游。 三、真核生物的转录 真核生物的转录也分为启始、延伸和终止三个阶段。 但对于转录机制的了解很少，从启动子方面说，就已经很复杂，而且参与转录的蛋白因子也很多，对于转录的终止目前还不清楚。这些问题还在进一步研究中。 真核生物mRNA转录的启始 转录起始因子： TFⅡ-D、TFⅡ-A、TFⅡ-B、TFⅡ-F、TFⅡ-E、TFⅡ-H 各转录起始因子作用： TFⅡ-D：首先与TATA区结合 TFⅡ-A：稳定TFⅡ-D与TATA区的结合 TFⅡ-B：帮助RNA聚合酶Ⅱ与启动子区结合 TFⅡ-F：与RNA聚合酶Ⅱ结合 TFⅡ-E：促进转录起始 TFⅡ-H：促进转录起始 TF ⅡA 真核生物mRNA转录的启始 启动子第四位点——增强子促进转录启始作用 四、真核生物转录后的加工 1、mRNA的转录后加工 2、rRNA转录后的加工 与原核生物相似，剪切加工，剪掉间隔序列。 3、tRNA转录后的加工 tRNA转录后的加工是切除tRNA前体两端多余序列。 tRNA前体（转录的原始本）5比成熟的tRNA多几个到十个核苷酸，由内切酶催化去除这些多余核苷酸。 5的切除由内切酶或外切酶催化。 最后在3端添加 CCA序列。 *