糖尿病大鼠膈肌功能损伤和钙调控蛋白基因表达的改变.PDF

J South Med Univ, 2013, 33(2): 177-181 doi 10.3969/j.issn. 1673-4254.2013.02.04 ·177 · 基础研究 糖尿病大鼠膈肌糖尿病大鼠膈肌功能损伤及钙调控蛋白基因表达的改变功能损伤及钙调控蛋白基因表达的改变 方迎艳，郭晓磊，高 琴，叶红伟，关宿东 蚌埠医学院生理学教研室，安徽 蚌埠 233030 摘要：目的研究糖尿病大鼠膈肌功能及钙调控蛋白基因表达的变化，探讨糖尿病大鼠膈肌功能损伤的发生机制。方法 使用链 脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型，SD 大鼠随机分为糖尿病组（随机血糖≥16.7 mmol/L）和正常对照组，造模后4 周、8周测定大鼠 体质量和膈肌/体质量比值，生化指标检测各组大鼠空腹血糖和膈肌组织线粒体琥珀酸脱氢酶（SDH）活性；应用体外灌流大鼠 膈肌条的方法，测定单收缩张力、最大强直张力、峰值收缩时间、半舒张时间、张力-频率曲线，电镜观察大鼠膈肌超微结构，采用 RT-PCR 检测大鼠膈肌肌质网钙泵（SERCA）和受磷蛋白（PLB）mRNA 表达。结果（1）与正常对照组相比，糖尿病大鼠体质量和 膈肌质量/体质量比值均明显降低（P0.01），膈肌组织SDH 的活性显著降低（P0.01）；（2 ）在给予大鼠膈肌条10、20、40、60、 100 Hz 刺激时，糖尿病大鼠膈肌在各频率下的收缩张力明显低于正常对照组（P0.01）；膈肌力学指标单收缩张力和最大强直张 力明显降低，峰值收缩时间和半舒张时间明显延长（P0.01）；（3）超微结构显示糖尿病组大鼠膈肌组织损伤明显，肌纤维断裂， 肌质网扩张，线粒体水肿，数目减少，脊断裂，空泡化或囊泡化，同时可见随病程延长膈肌损伤明显加重；（4）RT-PCR 结果提示： 与正常对照组相比，糖尿病组大鼠膈肌SERCA mRNA表达均明显降低（P0.01），糖尿病大鼠膈肌SERCA mRNA表达8周组比 4 周组明显降低（P0.01），糖尿病大鼠膈肌PLB mRNA 表达显著增强（P0.01）。结论 糖尿病大鼠膈肌超微结构受到破坏，线 粒体损伤和数目减少，线粒体SDH 活性降低，ATP 生成减少，膈肌组织SERCA mRNA表达减少和PLB mRNA 表达增强，引起 膈肌肌质网摄取Ca2+减少，促成膈肌收缩和舒张功能损伤。 关键词：糖尿病；膈肌；肌质网钙泵；受磷蛋白 Diaphragm dysfunction and expressions of calcium regulatory proteins in diabetic rats FANG Yingyan, GUO Xiaolei, GAO Qin, YE Hongwei, GUAN Sudong Department of Physiology, Bengbu Medical College, Bengbu 233030, China Abstract: Objective To study the changes in diaphragmatic function and gene expressions of calcium regulatory proteins in diabetic rats and explore the mechanism of diaphragm dysfunction in diabetes mellitus. Methods SD rats were randomly divided into normal control group and diabetic (induced by intraperitoneal STZ injection) group. After 4 and 8 weeks, the body weight and diaphragm to body weight ratio were measured, and the activities of succinic dehydrogenase (SDH) in the diaphragm and blood glucose were assayed. The diaphragm contractility was assessed and the alterations of d