软X射线显微成像.pdf

l991年 第l期 光 学 机 械 总第118期 软X射线显微成像 谢 行 恕 (中国科学技术大学 基础物理中心) ■■。软x射线显微成像技术为研究生物显微结构开辟了一条新的途径，突破 了光 学显擞镜和电子显微镜在应用上的某些限制。本文评述了软j【射线接触显微镜，软 j【射 线成像显微镜、软j【射线扫描显微镜l三L瘦三 皇款j【射线显徽成像和j【射线垒息术， 井 介 绍了中国科技大学在软x射线接触显撤成像方法坍究中所取得的成果。 一 、 引 言 生物学家早就梦想有一种显微工具，它可以观察 自然状态下的生物样品，分辨率达到或 接近分子水平，可以看到活细胞和细胞器的超撖结构阻至其 内部的动态变化。高亮度的软 射线光源 (同步辐射、 射线激光等)、高分辨率软 射线光学及高灵敏度、高速的 射线撵 硼器的发展巳使我们可能做成这样一种显檄工具，它就是软 射线显檄镜。 长期 来，光学显微镜和 电子显微镜是研究生物显馓结构的最常用工具。光学显搬镜使 用可见光为光源，由于受波长衍射效应的限制，它的成像分辨率不能超过2000盖，而且常常 需要对样品进行染色。电子显微镜虽然有很高的仪器分辨率 ，但研究生物样品时仍遇到许多 困难。为此，电镜学家采用了许多样品的准备方法如脱水、固定、切片及染色等等。这不仅 不可能实现在 自然状态下观测生物样品，而且由于人为性的样品准备因素破坏了样品的原始 状态，使得人们对观铡的真实性保持有一定的疑问。 图 l 工射线的线性暖牧系数和电子散射系数 软x射线显微成像技术开辟了一条新的途径。由于软x射线与物质相互作用的特点使 之 适用于较厚的生物样品 (厚度到几个am，它是典型的完整细胞线度)，不需脱水、切片和染 色。因此可能直接观察活的生物样品(图1)。在辐射损伤允许的剂量下分辨率仍可达到100A。 使用同步辐射产生的单色、可调软x射线可以实现 样品的高分辨率微区元素分析 应用软 x射线垒息等方法还可 以做到三维立体成像 。 当前，美、德、 日、英、法、苏等国的科 学家都正在积极研制各种形式的软x射线显微 镜，并应用生物、医学的样品进行试验 ，取得了显著的进展。过去十年中世界范围内从事高 分辨x射线显微镜研制的工作增长了一个数量级，而将其应用于生物及医学的研究工作也增 长了5倍 以上。预计夸后十年内各种软 射线显微成像方法将会 日趋完善，能够实现活细胞 的实时成像，分辨率达到100^。这将是九十年代软x射线光学技术研究的一项重要 成 果。 它对干生物，医学及其它科学 (冶金、陶瓷，薄膜，地质等)必将发挥重要作用，产生重要 的社会及经济意义。 二、高分辨率软x射线显微镜 1．软 射线接触显微成像 软 射线接触显微术是软 射线显微成像中最简单、 但也是迄夸唯一能达到理论分辨率 极限 的方法，原理如图 2所示。试验样 品紧贴 着放在对于软 射线灵敏的探测器 上 (如 射 线光刻胶)。经过软 射线 “曝光”及 “显影”后 在光刘胶上留下辐射损伤的图样。通过光学或 电子显微镜可以读 出 射线显微图。近期的发 展主要是使用了高分辨率的 射线光刘胶 (如 PMMA)作为探测器及应用高分辨率电子显 微镜，特别是透射电镜读出图像。软 射线接 图2 软工射线接触显微成像装