2017-2018年高中生物 第1章 微生物培养技术 第2节 培养基对微生物的选择作用学案 中图版选修1.docVIP

第二节 培养基对微生物的选择作用 一、选择培养基 1．含义 能让特定的微生物生长，抑制其他微生物生长，从而将所需要的微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基。 2．操作原理 配制选择培养基时，可加入某些物质或除去某些营养物质，也可以加入某种化学物质，从而抑制不需要的微生物的生长繁殖。 二、平板培养基的制备 称量：根据培养基配方，准确称取各原料成分。 溶解：在锥形瓶中加适量蒸馏水后，在电炉上边加热边搅拌直至琼脂完全溶化，然后加蒸馏水至1 000 mL。 调节pH 　 分装、包扎：做好标记。 　 灭菌：置于高压蒸汽灭菌锅中，121 ℃下灭菌20 min。 　 倒平板：将灭菌后的培养液冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。 接种操作为什么要在酒精灯火焰旁进行？ 【提示】　接种时应确保一个无菌的环境。 预习完成后，请把你认为难以解决的问题记录在下面的表格中 问题1 问题2 问题3 问题4  一、培养基的种类 二、无菌技术 1．概念：无菌技术不仅能防止实验室的培养物被其他外来微生物污染，保持微生物的纯培养，而且在分离、转接时亦能防止其他微生物污染。 获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括以下几个方面： (1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洗和消毒(disinfection)。 (2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌(sterilization)。 (3)为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。 (4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。 2．消毒与灭菌的区别与联系 消毒是指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。消毒属于部分灭菌。 三、接种技术 1．用接种环接种 (1)先点燃酒精灯，再取两支盛有培养基的试管，其中一支内有菌种。用拇指和其他四指夹住试管，使管口平齐，管内培养基斜面向上(如图1)。 (2)手持接种环，将接种环的环端和接种时可能进入试管的部分放在火焰上，来回灼烧多次(如图2)。 图1　　　　　图2 (3)在火焰附近用握有接种环的那只手的小指、无名指、中指和掌心拔去两支试管上的试管塞，迅速将试管口通过火焰2～3次，以杀灭试管口上沾染的微生物(如图3)。 (4)将灭过菌的接种环伸入菌种管，先将环部接触培养基斜面顶端等部位使其冷却，再轻轻挑取少许菌体。在抽出接种环时，注意其带菌部分不要触及管壁或通过火焰(如图4)。 图3　　　　　图4 (5)迅速将上述带菌的接种环伸入待接种的试管中，在培养基斜面上由底部向上轻轻划“S”型曲线，将菌种接种到培养基上。划曲线时不要将培养基的表面划破(如图5)。 (6)将试管口与试管塞通过火焰2～3次，迅速塞紧试管。多次灼烧接种环后，放回原处。将接种过菌种的试管，放在恒温箱中(37 ℃)培养24 h(如图6)，观察接种和培养的结果。 图5　　　　 　　图6 2．稀释平板涂布操作 涂布平板时，稀释平板涂布的操作比较复杂，且各个细节均需保证“无菌”，应特别注意： (1)酒精灯与培养皿的距离要合适。 (2)吸管头不要接触任何其他物体。 (3)吸管要在酒精灯火焰周围使用。 (4)移液管需要经过灭菌。操作时，移液后用手指轻压上端的橡皮头，吹吸三次，使菌液与水充分混匀。 (5)将涂布器末端浸在盛有体积分数为70%的酒精的烧杯中。取出时，要让多余的酒精在烧杯中滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃。 选择培养基的配制原理 　下面是某实验室中将用到的培养基配方，请根据下表回答下面的问题。 编号 成分 含量 ① KH2PO4 1.4 g ② Na2HPO4 2.1 g ③ MgSO4·7H2O 0.2 g ④ 葡萄糖 10.0 g ⑤ 尿素 1.0 g ⑥ 琼脂 15.0 g 将上述物质溶解后，用自来水定溶到1 000 mL (1)在该培养基的配方中，为微生物提供碳源的是________，提供氮源的是________。 (2)绝大多数微生物都能利用________，但是，只有能合成脲酶的微生物才能分解________。(填编号) (3)分析该培养基的配方，该培养基对微生物是否具有选择作用？如果具有，又是如何进行选择的？ 【审题导析】 →→ 【精讲精析】　表中营养成分中只有葡萄糖含有碳元素，只有尿素含有氮元素。绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但是，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，所以这种培养基对微生物有选择作用。选择的原理是只有能够利用尿素的微生物才能够生长。 【答案】　(1)葡萄糖　尿素 (2)④　⑤ (3)有选择作用。