气相色谱―质谱法测定动物肝脏中β―受体激动剂残留.doc

气相色谱―质谱法测定动物肝脏中β―受体激动剂残留 　　摘要 研究了动物肝脏中3种β-受体激动剂（包括盐酸克??特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺）残留量的气相色谱-质谱测定方法。样品经乙酸铵、乙酸乙酯∶异丙醇（6∶4）提取，PCX阳离子交换柱净化，再经BSTFA衍生，HP-5MS毛细管柱分离，基质匹配内标法定量。结果表明：3种β-受体激动剂在1.0～20.0 μg/L浓度范围内均有良好的线性关系，相关系数不低于0.998，在17.5 min内获得良好的分离，3种β-受体激动剂加标回收率为85.4%～106.7%，相对标准偏差在4.9%～10.5%之间（n=6） 关键词 气相色谱-质谱法；动物肝脏；盐酸克伦特罗；沙丁胺醇；莱克多巴胺 中图分类号 X839.2；TS207.5 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2016）23-0244-02 Abstract A Gas Chromatography-Mass Spectrometry method was developed for rapid determination of 3 β-agonists residue（including clenbuterol，salbutamol，ractopamine） in pig liver.The samples were extracted with ammonium acetate，ethyl acetate∶isopropanol（6∶4） and cleaned up by PXC column.The targer compounds were derivatized with BSTFA and detected by GC-MS.A matrix matched internal standard was used for quantitative analysis.The results showed that three β-agonists well separated within 17.5 min.The calibration curves were in good linearity between the peak area and the concentration of 1.0～20.0 μg/L for 3 β-agonists with correlation coefficients not less than 0.998.The spiked recoveries ranged from 85.4% to 106.7% with RSD′s in the range of 4.9%-10.5% （n=6）. Key words GC-MS；animal liver；clenbuterol；salbutamol；ractopamine β-受体激动剂又叫瘦肉精，是一类结构功能类似于肾上腺素和去甲肾上腺素的苯乙醇类衍生物[1]，是一种拟交感神经作用药，具有松弛平滑肌、支气管扩张等作用，常用来治疗支气管哮喘等疾病[2]。其能够用来改善动物养分的代谢途径，促进动物肌肉的合成，抑制脂肪合成的积累，即具有营养“再分配效应”[3]，被不法商家添加于动物饲料中，用以减少动物脂肪含量，提高畜禽产品瘦肉率。但是食用含有瘦肉精的畜禽会严重危害人类健康，我国已经明确将其列入禁用药品目录 目前，有关β-受体激动剂的分析检测方法有液相色谱[4]、（气相、液相）色谱-质谱法[5-6]、免疫吸附法[7]等。本文利用固相萃取/气相色谱-质谱法对动物肝脏中盐酸克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺3种β-受体激动剂进行测定，该方法前处理简单，回收率和精密度均较好 1 材料与方法 1.1 仪器与试剂 IKA T18匀浆机（德国IKA公司），固相萃取装置，Ohaus先行者百分之一天平（奥豪斯仪器（上海）有限公司），Poxwar漩涡混合器（苏州珀西瓦尔实验设备有限公司），海科氮吹仪（青岛海科仪器有限公司），固相萃取装置，Agilent 7890A-5977型气相色谱质谱联用仪（美国安捷伦公司）。氯化钠、分析纯异丙醇、乙酸乙酯、高氯酸、氢氧化钠、氨水、乙酸铵，以上均为分析纯，均由广州化学试剂厂生产；色谱纯甲苯由德国Merck公司生产；衍生剂BSTFA由美国Supelco公司生产；60 mg 3 mL PCX固相萃取小柱由美国Waters公司生产 盐酸克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺3种β-受体激动剂标准品均购自德国Dr.Ehrenstorfer，用甲醇将其分别配制成1 000 mg/L标准溶液，使用前用甲醇稀释成所需浓度的混标工作液 1.2 试验方法 1.2.1 样品的提取与净化