脑力苏胶囊对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及磷酸酯酶2A的影响.pdfVIP

前 言 另外同时还有多种因素如细胞凋亡、乙酰胆碱系统、一氧化氮、离子通道、炎症 反应、免疫机制、凝血机制障碍、兴奋性氨基酸毒性、自由基损伤等参与了血管 性痴呆的发病过程。 [5] 有机构对 VD 患者进行了多中心的临床与病理研究 ,结果发现约 55%患者的脑 组织病理中可见到神经原纤维缠结、老年斑形成及神经细胞缺失等组织学改变, 神经原纤维缠结是Tau 蛋白的异常磷酸化导致,据此推测Tau 蛋白在血管性痴呆发 [6-7] 病机制中可能起到作用 。神经原纤维缠结（NFT ）主要由双螺旋细丝(PHF)组成。 [8-9] 而 PHF 主要由过度磷酸化的 Tau 蛋白构成 。Tau 蛋白是神经系统特异性微管相 关蛋白,在维持微管系统的稳定性中起重要作用[10- 11] 。孙蓉等也认为Tau 蛋白表达 [12] 增多及过度磷酸化在血管性痴呆发病机制中可能起到非常重要的作用 。大量的 研究[13- 14]证实多种蛋白激酶（protein kinase，PK ）和蛋白磷酸酯酶（protein phosphatase，PP ）参与Tau 蛋白的磷酸化。蛋白激酶活性的增强或蛋白磷酸酯酶 活性的减弱均可使 Tau 蛋白出现过度磷酸化。磷酸酯酶活性降低尤其是 PP-2 A [15] 活性降低可能在 tau 蛋白的异常过度磷酸化中起关键性作用 。在体外将 AD 磷 酸化 Tau 蛋白分别与不同蛋白磷酸酯酶保温再定量检测其磷酸释放量，发现 PP-2A、PP-2B 和 PP-1 分别可使异常 Tau 蛋白水解释放其57%，36%和 30%的磷酸 ［16］ 基 。此外酶动力学研究资料也证明：PP-2A 是活性最强的 Tau 蛋白磷酸酯酶， 其去磷酸化作用的 Km 值为（8.0±2.8）μmol/L[17] 。近年来研究证明 AD 患者脑中 磷酸酯酶 PP-2A 活性相对于同龄对照组来说下降几乎达 30%[18] 。磷酸酯酶2A 的活 性调节研究在血管性痴呆发病中的作用可能会受到关注。 目前关于血管性痴呆与磷酸酯酶2A 的关系尚少，本试验采用双侧颈总动脉反 复夹闭制备慢性脑缺血模型，研究在磷酸酯酶 2A 与血管性痴呆发病的相关性，为 血管性痴呆的发病机制及临床治疗提供理论依据。 血管性痴呆属于中医学“呆病”范畴，病因复杂。导师根据自己多年的临床 实践体会，认为本病多以肾虚为本，血瘀、痰浊为标，确立补肾益精、涤痰化瘀 的治疗大法，选用先进工艺制成的脑力苏胶囊，经多年验证，运用该药治疗血管 性痴呆每获良效，并能改善中风后遗症状。本实验通过反复夹闭双侧颈总动脉致 慢性脑缺血建立学习记忆障碍的大鼠痴呆模型，借助现代实验室手段，观察脑力 苏胶囊对痴呆大鼠模型的行为学以及组织病理学的改变，探究脑力苏胶囊作用的 机制机理，进而为临床实验提供科学的方法及理论依据。 - 5 - 脑力苏胶囊对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及磷酸酯酶2A 的影响 材料与方法 1 实验材料 1.1 实验动物 健康雄性 SD 大鼠，100 只，清洁级，鼠龄 10-12 个月，体重 250±30g，均 有郑州大学医学院实验动物中心提供(动物许可证号 scxk 豫 2007-0001)。分组 笼养，自由饮水与摄食（动物饲料由郑州大学实验动物中心提供，许可证号 scxk 豫 2007-0001）。室温20±3℃，按时通风，每周两次更换垫料，保持环境安静， 日光辅助照射，维持每日光照10 小时。 1.2 实验药物 治疗用药：脑力苏胶囊(主要成分：人参、熟地、枸杞、灵芝、川芎、天南星等 中药组成，每克相当于生药2.25g)，以补肾益精、涤痰化瘀为组方原则，河南省中 医药研究院动物实验中心提供。 对照用药：喜得镇片（化学名：甲磺酸双氢麦角毒碱片）：1mg/片，由天