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第三讲固定化酶、蛋白质的分离及pcr技术
“课下提能练”见“课时跟踪检测(三十八)”(进入电子文档) 备考基础·查清 高频考点·悟通 迁移应用·练透 课下提能练 首页 上一页 下一页 末页 结束 生物 第三讲 固定化酶、蛋白质的分离及PCR技术 备考基础·查清 高频考点·悟通 迁移应用·练透 课下提能练 谢谢观看 结束 首页 上一页 下一页 末页 生物 [动漫演示更形象 见课件光盘] 超链接 各种分子 的差异以及分子本身__________ 的不同 电泳法 根据 分离蛋白质 凝胶色谱法 原理 方法 × √ √ √ × × × × √ √ × 通过物理吸附作用,把酶或细胞固定在纤维素、琼脂糖、多孔玻璃或离子交换树脂等载体上 物理吸 附法 利用共价键、离子键将酶分子或细胞相互结合,或将其结合到载体上 化学结 合法 将酶或细胞均匀地包埋在不溶于水的多孔性载体中 包埋法 图示 原理 名称 固定化酵母细胞 固定化葡萄糖异构酶 实例 可能导致反应效果下降 一种酶只能催化一种或一类化学反应 缺点 成本低,操作更容易 酶与反应物结合,又与产物分离,固定在载体上的酶可反复利用 优点 特点 包埋法 化学结合法、物理吸附法 适用方法 一系列 一种 固定酶 的种类 固定化细胞 固定化酶 后流出 先流出 洗脱次序 较长 较短 运动路程 垂直向下和无规则扩散运动 垂直向下 运动方式 进入凝胶颗粒内部,被滞留 被排阻在凝胶颗粒外面,迅速通过 凝胶内部 相对分子质量小 相对分子质量大 蛋白质 比较 高温 体内温和条件 温度 DNA或RNA RNA 引物 Taq DNA聚合酶 DNA解旋酶、DNA聚合酶 酶 90℃以上高温解旋,双链完全分开 在解旋酶作用下,边解旋边复制 解旋 不 同 点 PCR 细胞内DNA复制 ①需提供DNA复制的模板; ②四种脱氧核苷酸为原料; ③子链延伸的方向都是从5′端到3′端 相 同 点 PCR 细胞内DNA复制
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