人支气管上皮癌变各阶段组织2DE图谱的建立.pdfVIP

Resea ·94· 生命科学研究LifeSciencerch 人支气管上皮癌变各阶段组织2-DE图谱的建立① 2 吴晓英1’2，肖志强1，陈主初h (1．中南大学湘雅医院医学实验研究中心，长沙410008；2．中南大学湘雅医学院肿瘤研究所，长沙410078) [摘 要]目的：优化支气管上皮组织的蛋白质样品制备方法，建立人支气管上皮癌变过程各阶 段组织的双向电泳(2一DE)图谱。方法：收集、筛选人支气管正常上皮、鳞状化生、不典型增生和 上皮浸润癌组织标本。脱氧胆酸一三氯醋酸(OOC-TCA)法抽提组织的总蛋白质，固相pH梯度双 向凝胶电泳分离总蛋白质，凝胶经银染显色后，用ImageMaster2D软件分析2-DE图谱。结果：应 用D(×、-TCA法提纯的支气管上皮总蛋白质进行双向电泳，可获得分辨率高、重复性好的人支气 管上皮组织的双向电泳图谱。正常上皮、鳞状化生、不典型增生和浸润癌4种组织凝胶的平均蛋 白质点数依次为1190士63，1227士69，1272士71和1326土82。选取同一例鳞状上皮化生组织进 行3次重复性检测，3块凝胶的平均点数为1 218士75，平均匹配点数为1082士67，匹配率达 89．3％，且3块胶在蛋白质点位置上有较好的重复性，不同胶间蛋白质点在IEF方向的偏差为 淀法是一种较好的支气管上皮组织蛋白质样品制备法；2)初步建立了分辨率较高、且重复性好的 人支气管上皮癌变各阶段组织的双向凝胶电泳图谱，为进一步鉴定肺鳞癌癌变相关蛋白质奠定了 基础。 [关键词]人支气管上皮；癌前病变}双向凝胶电泳；蛋白质表达谱 Establishmentof2-DE of profiles tissueof humanbronchial dysplasia‘carcinoma epithelium WU Zhu-chul·2 Xiao-yin91一，XIAOZhi—qian91。CHEN (1．MedicalResearch South Center，XiangyaHospital，Central 410008，China； University，Changsha 2．CancerResearch SchoolofMedicine， Institute，Xiangya CentralSouth 410078，China) University，Changsha the methodfor [Abstract]Objective：Toprotein bronchial tissues optimize preparation epithelial andtoestablishtwo-dimensional fromthe gelelectrophoresisprofiles carcinomatissueofhumanbronchial seriesofmethods I)OC—TCA