AML－1-ETO基因相关的AML－M2型白血病免疫表型分析论文.docVIP

　　AML－1/ETO基因相关的AML－M2型白血病免疫表型分析论文 张建军 杜欣 黄志新 苏健华 周茂华 【摘要】 本研究探讨AML/ETO基因重排的FAB分型为AMLM2患者的骨髓免疫表型的特征和预测性，以及与急性早幼粒白血病（APL）的区别。应用流式细胞术分析17例经荧光原位杂交（FISH）检测AML1/ETO融合基因阳性、FAB分型为AMLM2（M2/ETO+）患者骨髓的免疫表型，并与34例AML1/ETO阴性、FAB分型AMLM3、临床诊断为APL患者进行了比较。结果发现，17例M2/ETO+患者骨髓中均可见一群（15.89%-68.53%）原始细胞和一群SSC较高异质性的粒细胞。原始细胞表达干细胞相关抗原CD34、HLADR和髓系抗原CD33、CD13、MPO。在M2/ETO+患者中CD33表达强度显著低于APL患者（P 0.001），HLADR、CD19和CD34+CD56+共表达的阳性率均显著高于APL患者（P 0.001），而CD9的表达率则显著低于APL患者（P 0.001）。M2/ETO+患者粒细胞表达分化的髓系抗原CD11b和CD15，并可分为CD15+CD11b-和CD15+CD11b+两群，而成熟的粒细胞标志CD10均为阴性.freelmunophenotypic Features of Acute Myeloid Leukemia yeloid leukemia (AMLM2) and is associated ia usually yelocyte leukemia (APL) in morphology. In order to investigate the immunophenotypic characteristics of bone marroent classified by FAB, immunophenotype of bone marroed by fluorescence in situ hybridization etry as pared munophenotype in 34 APL patients ore heterogeneous myeloid cells cell associated antigens CD34, HLADR and myeloid antigens CD33, CD13, MPO. The mean fluorescent intensity of CD33 in M2/ETO+ patients eanmature events shoore mature CD15+CD11b+ populations, the expression of mature granulocytes CD10 ilar to APL in expression figure. The granulocytes expressed CD56 in 17 patients ent ed to express an exclusive immunophenotype that shoultiparametric floetry ia subtype AML1/ETO基因相关的AMLM2型白血病免疫表型分析 AML1/ETO融合基因是由染色体t（8；21）（q22；q22）易位累及21号染色体的急性髓系白血病基因1（AML1）和8号染色体的ETO（eight tACPROBEVA 2.3 FISH图象分析系统。 形态学检查 全部病例均经血象检查、骨髓形态学观察。血片与骨髓涂片经瑞氏染色，按血液学常规进行分型。 AML1/ETO融合基因检测 取EDTA三钾抗凝骨髓2 ml，用0.075 mol/L KCl低渗和甲醇∶冰醋酸（3∶1）固定提取骨髓单个核细胞，用AML1/ETO和PML/RARα探针进行荧光原位杂交，然后用荧光显微镜和FISH图象分析系统进行结果分析。每例数200-500个细胞，计算出阳性细胞百分数。核型异常识别参照IS（1995）国际体系。 免疫表型分析 使用全血三色直接免疫荧光标记法进行染色。取EDTA三钾抗凝骨髓50 μl注入试管里，加入FITC、PE和PreCP标记的单克隆抗体，充分混合，放置室温避光孵育30分钟。加入红细胞裂解液1ml，在室温下放置5-10分钟。200×g离心5分钟，去掉上清液，用PBS洗涤1次，加入0.5 ml 1%多聚甲醛缓冲液固定。胞浆内MPO的染色首先标记表面抗体，加入裂解固定液，离心去掉上清，加入0.5 ml透膜剂10分钟，以含1% FBS的PBS洗涤1次，加入MPO-FITC抗体孵育30分钟，用1% FBS的 PBS洗涤，流式细胞仪检测。每次检测前先用CaliBRITE