Bcl┐2及Bag┐1基因产物在肾癌组织中的表达及意义论文.docVIP

　　Bcl┐2及Bag┐1基因产物在肾癌组织中的表达及意义论文 .freels;immuno-histochemistry;geneexpression Abstract:AIMToinvestigateBcl-2andBag-1expressionsinrenalcellcarcinomasandtoevaluatetheirclinicalsignifi┐cance.METHODSBcl-2andBag-1expressionsmunohistochemstryStreptavidin-Biotin-Peroxidaseplex（SABC）methodsin41samplesofrenalcarcinomatissuesandin10normalrenaltissues，andtheirclinicalsig-nificanceatissuesalrenaltissues（P 0.05）.Ac-cordingly，thepositiverateofBag-1expressioninthecarci-nomatissuesaltissues（P 0.05）.Hoorgrade，clinicalstageandpathologicalcelltypes.Ontheotherhand，Bag-1orgrade，tumorstageandtheprognosisofthepatient（P 0.05）.Significantcorrelationightserveasaprognosticmakerfortherenalcellcarcinoma.Bcl-2mightbeinvolvedinthetrans-formationofbenigntomalignantprocessbutisnotrelatedtothedegreeofdifferentiationofthetumorcells. 0引言 Bcl-2与Bag-1都是细胞抗凋亡基因，在肾癌的发病及肾癌细胞逃避凋亡的过程中可能具有不可忽视的重要作用.我们用免疫组化方法控制Bcl-2和Bag-1在肾癌不同病理阶段的表达水平，与正常肾组织作对照，以了解Bcl-2与Bag-1表达的意义及相互关系. 1材料和方法 1.1材料1989/1997手术切除的肾癌石蜡包埋组织块41例，均来自我院病理科存档标本，平均年龄58.4（46～77）岁.其中透明细胞癌26例，颗粒细胞癌15例.按分期:Ⅰ期18例，Ⅱ期12例，Ⅲ期8例，Ⅳ期2例.所有病理均获随访8mo～5a，平均5a生存率为70.7%.正常肾组织石蜡标本10例作对照. 1.2方法兔抗人Bcl-2抗体购自美国SantaCruz公司，兔抗人Bag-1抗体由加拿大Dr.H.BlissMurphy癌症中心赠送，SABC免疫试剂盒购自武汉博士德公司.石蜡组织连续切片5μm厚，常规脱蜡至水.采用SABC法测定Bcl-2与Bag-1的表达.抗Bcl-2及Bag-1的工作浓度1∶50，生物素化单抗和SABC试剂的工作浓度均为1∶100.石蜡切片经抗原修复后，滴加1∶50抗Bcl-2或抗Bag-1抗体，4℃过夜，次日滴加生物素化山羊抗兔IgG及SABC试剂，DAB显色，苏木精复染，以PBS代替一抗作阴性对照，以已知阳性反应片作阳性对照.Bcl-2染色胞质棕黄色为阳性，Bag-1胞质胞核棕黄色染色为阳性.在10×40倍光镜下随机观察5个视野，计算其平均数，每个视野计数100个细胞.Bcl-2阳性标准:阳性细胞占肿瘤细胞数 30%为低表达（+），30%～50%为中度表达（）， 50%为高表达（）.Bag-1染色阳性细胞 10%为低表达（+），10%～30%为中度表达（）， 30%为高表达（）. 统计学方法:阳性表达率比较用χ2检验，平均表达率比较采用t检验，Bcl-2与Bag-1关系采用相关系数（r）分析. 2结果 2.1Bcl┐2与Bag┐1在肾癌组织中的表达 2.1.1Bcl-2的表达10例正常组织中，阳性3例，阴性7例，阳性率30.0%，阳性细胞多分布在肾小管上皮及肾小球壁层细胞.41例肾癌组织中，阳性31例，阴性10例，阳性率75.6%，Bcl-2蛋白主要表达在癌细胞的胞质，呈棕黄色颗粒.肾癌组织中Bcl-2表达明显高于正常组织，χ2检验，二者有显著差异（P 0.05）.肾癌的两种细胞类型中，Bcl-2蛋白在26例透明细胞癌中，阳性19例，阳性表达率为73.1%，15例颗粒细胞癌中，阳性12例，阳性率则为80.0%，χ2检验，二者无显著差异（P 0.05），说明Bcl-2的表达与肾癌细胞类型无明显相关（Fig1）.2.1.2Bag-1的表达Bag-1蛋白表达在癌细胞的