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ND308抗脑缺血神经保护作用的研究论文.doc
ND308抗脑缺血神经保护作用的研究论文
谭君 梁绪国 严鹏 田京伟
【摘要】 目的 观察ND308对大鼠局灶性脑缺血的保护作用,探讨ND308抗脑缺血作用的机制。方法 78只健康雄性SD大鼠,采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血再灌注(Ischemia/Reperfusion)模型,随机分为6组:模型组、假手术组、ND308小剂量组(5 mg/kg)、ND308中剂量组(10 mg/kg)、ND308大剂量组(20 mg/kg),阳性对照依达拉奉组(6 mg/kg),于再灌注后30 min内尾静脉注射给药。缺血2 h再灌注24 h后测定神经行为障碍评分、脑梗死体积,HE染色观察缺血皮层组织形态学变化,采用免疫组织化学染色法测定IL1β、TNFα、NFκB的表达。结果 ND308治疗组与模型组相比神经系统症状减轻.freelia in rats, and to discuss the possible mechanism.Methods A rat model of focal cerebral ischemiareperfusion injury iddle cerebral artery occlusion using modified filament method.A total of 78 healthy male SD rats ly and equally divided into six groups: sham control group,model group,ND308 treated groups (5 mg,10 mg and 20 mg/kg ),positive control edalavone group (6 mg/kg). All drugs inistered via tail vein injection in after reperfusion. After 2 h ischemia folloeasured. Immunohistochemistry anner. ND308 loodel group). Other groups shoodel group).Conclusion ND308 may have protective effects on focal cerebral ischemic reperfusion injury through antiinflammatory effect.
【Key iareperfusion,inflammatory reaction,NFκB
丹参为唇形科植物丹参(Saluia miltiorrhiza Bge) 的干燥根及根茎,其制剂丹参片、丹参注射液在临床上用于心脑血管疾病治疗。丹参酚酸B是丹参主要的活性成分,据报道丹参酚酸B能够减少脑缺血和/或脑缺血再灌注损伤,改善其行为障碍和学习记忆能力1;而且丹参酚酸B能够改善微循环、促进血管新生2、调节基质金属蛋白酶(MMPs)活性,同时也能够抑制内皮细胞通透性3。化合物ND308【(2E)2{6(E)2羧基乙烯基2,3二羟基苯基}-3(3,4二羟基苯基)丙烯酸】为大鼠灌胃或者静脉注射丹参酚酸B之后在脑内发现的主要代谢产物,是一个从未报道过的全新化合物。山东省天然药物工程技术研究中心研究人员在体外将丹参酚酸B降解得到了该化合物,并于2007年8月申报了新化合物专利:“一种新的酚酸类化合物、制备方法及其药物组合物和应用”,专利申请号:200710015108.8。
通讯梁绪国,Email:liangxuguoyahoo.. 化合物ND308为丹参酚酸B在脑内的降解产物,说明该化合物能够透过血脑屏障。我们前期研究发现ND308对缺糖缺氧致培养大鼠神经元损伤有显著的保护作用,现在我们利用大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,观察ND308对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用,并探讨其作用机制。
1 材料与方法
1.1 试验动物 清洁级雄性Spragua Dag/5 ml,批号80041101。
1.3 试剂 氯化三苯四氮唑(TTC):Sigma公司,UltraSensitiveTMSP免疫组化染色试剂盒、多聚赖氨酸(PolyLLysine)、DAB显色试剂盒、柠檬酸盐组织抗原修复液:福州迈新生物技术开发有限公司;兔抗大鼠IL1β、TNFα、NFκB抗体:北京博奥森生物技术有限公司,其余试剂均为国产分析纯。
1.4 方法
1.4.1 采用改良Longa法制作MCAO模型4,大鼠用10%水合氯醛(0.35 ml/100 g)腹腔注射麻醉后,仰卧固定,颈部皮肤用碘伏消毒;颈部正中切开,
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