Thapsigargin对人晶状体上皮细胞系SRA01-04增殖抑制的作用机制论文.docVIP

　　Thapsigargin对人晶状体上皮细胞系SRA01/04增殖抑制的作用机制论文 姬红培， 吴明星， 彭瑞萍 【摘要】 【目的】 研究thapsigargin（TG）对体外培养的人晶状体上皮细胞系SRA01/04增殖的影响，并探讨其分子机制。【方法】 不同浓度TG处理SRA01/04细胞72 h，噻唑蓝比色法（MTT）检测细胞增殖；流式细胞仪（PI法）检测细胞周期改变；透射电镜观察细胞超微结构变化；TUNEL法检测细胞核中DNA的断裂情况；激光共焦显微镜和流式细胞仪检测Caspase3活性亚单位（17/19 ku）的表达及阳性细胞表达率。【结果】 MTT法测得TG为0.325～5 μmol/L时，细胞增殖抑制率变化显著，IC50大约为0.8 μmol/L;透射电镜显示TG处理SRA01/04细胞膜皱缩，染色体浓缩、边集、核膜裂解、凋亡小体形成;流式细胞仪（PI法）及TUNEL法检测TG浓度为0.freelol/L分别处理SRA01/04细胞72 h，细胞凋亡率随浓度的增加而增加，呈浓度依赖性;TG处理后细胞Caspase3阳性表达率也呈浓度依赖性增加,TG为10 μmol/L时，几乎每个细胞浆内Caspase3都被激活。【结论】 Thapsigargin可能通过激活Caspase3为诱导体外培养的人晶状体上皮细胞系SRA01/04细胞凋亡而抑制其增殖，TG为预防后发性白内障的药物研究提供了基础。 【关键词】 Thapsigarigin； 晶状体上皮细胞； 细胞凋亡； Caspase3 Effect and Mechanism of Thapsigargin on Proliferation of Human Lens Abstract: 【Objective】 To investigate the effect of thapsigargin (TG) on the proliferation of human lens epithelial cells line SRA01/04 in vitro and underlay the molecular mechanism. 【Methods】 SRA01/04 cells edium ethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide (MTT) assay. Ultrastructure ission electron microscopy. DNA fragmentation easured by terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-nick end-labeling (TUNEL). Cell cycle analysis ined by floetry (FCM) iodine (PI) staining. Expression of cleaved caspase 3 protein icroscopy and floetry. 【Results】 The gro 0.325 to 5 μmol/L. The ultrastructure of treated SRA01/04 cells shoatin condensation, chromatin crescent formation, nucleus fragmentation and apoptotic body formation. Exposed to 0, 0.1，0.5，1.0, 10 μmol/L TG for 72 h, the apoptotic rate by floetry (PI means) and TUNEL anner. The expression of caspase3 anner. The positive rate ol/L. 【Conclusion】 The groanner in vitro by inducing up-regulation of caspase 3 activation and starting apoptosis pathay be developed as a potential therapeutic drug for posterior capsule opacification prevention. 后发性白内障是白内障术后影响视功能的严重的远期并发症之一，白内障术后残留的晶状体上皮细胞增殖、迁移、化生是其发生的病理基础1。目前手术中技术和人工晶状体的光学部设计等方面的改进使后发性白内障的发生率有所下降2,3，但白内障术后残留的晶状体上皮细胞的增殖仍是眼科界亟待解决的的难题。后发性白内障防治的关键是发现一