免疫耐受与调节_培训课件.ppt

* 1962年英国格拉斯医院Grist 在非近交的小鼠中偶然发现有个别无毛小鼠， 后来证实是由于基因突变造成的并伴有先天性胸腺发育不良，称为裸小鼠(nude mice)，用“nu”表示裸基因符号。裸小鼠是由于染色体上等位基因(第11对染色体上)突变引起的，已失去正常胸腺， 原胸腺残留结构部分上皮样细胞呈巢状排列而部分呈外分泌腺结构。裸鼠淋巴结胸腺依赖区的淋巴细胞消失，外周血中淋巴细胞数目减少。1969年丹麦Rygaard首先将人类结肠腺癌移植裸小鼠成功，为免疫缺陷动物研究和应用开创了新局面。 ??? (二)特性：裸小鼠的主要特征表现为无毛(hair less)和无胸腺(athymus)。随着鼠龄增加皮肤变薄、头颈部皮皱褶、发育迟缓。由于无胸腺,仅有胸腺残迹或异常上皮,这种上皮不能使T细胞正常分化，缺乏成熟T细胞的辅助、抑制及杀伤功能，因而细胞免疫力低下。裸小鼠B淋巴细胞正常，但功能欠正常，免疫球蛋白主要是IgM,只含少量IgG。裸鼠由于T淋巴细胞缺陷，不能执行正常T淋巴细胞功能，在混合淋巴细胞反应中全无有丝分裂反应，也不产生细胞毒效应细胞，对刀豆A或植物凝集素亦无有丝分裂应答,无接触敏感性，无移植排斥，成年裸小鼠(6－8周龄)较普通鼠有较高水平的NK细胞活性，但幼鼠(3－4周龄)的NK细胞活性低下。裸小鼠粒细胞比普通小鼠数量少。由于背景品系不同，不同品系的裸鼠往往具有不同的生物学特征。必须指出，随着裸小鼠年龄增长或有关因素的影响(如病毒感染),裸鼠体内正常T细胞会增加，故接种肿瘤实验一般采用4￣8周小鼠。 ??? (三)繁殖：裸小鼠抵抗力差，易患病毒性肝炎和肺炎，因而饲养和繁殖要求条件比较严格，在SPF环境下可生存，所用的笼具、垫料、饲料、 饮水等都要求经过严密灭菌消毒并采用隔离器饲养，以保证长期存活并进行繁殖。由于纯合型雌裸小鼠nu/nu 受孕率低，乳腺发育不良且有食仔的习惯，因此生产上一般采用纯合型雄鼠与杂合型雌鼠交配(♂nu/nu×♀nu/＋)可获1/2纯合型仔代。 （Specefic pathogen Free,SPF）无特定病原体 * 对完全迪格奥尔格（DiGeorge）综合征患儿――一种致命性先天病症，其特征是无胸腺、甲状旁腺功能减退和心脏缺陷，出生后同种异体胸腺组织移植后立即继之以免疫抑制是一种有希望的治疗方法。 * * 由于胚胎期，机体不成熟的免疫系统已经接触过自身组织抗原，所以机体免疫系统不会对自身的组织器官产生免疫应答。 即维持自身耐受。 * 由于天然耐受的建立，因此器官移植术的最佳选择应该是自体组织或器官。比如说：现在已有自体皮肤移植、自体骨骼移植、自体骨髓干细胞移植等。但是有某些器官只有一个，不能进行自体移植。怎么办？ 随着现代生物医学技术的发展，人们可以从脐血干细胞诱导定向分化成为某种组织细胞甚至完整的器官，比如肌肉细胞、神经细胞、肝细胞等，相信不久的将来人类完全可以实现任意器官或组织的自体移植。所以现在非常提倡储存新生宝宝的脐带血，那等于是为宝宝的未来储存一份健康。 * 小鼠新生期免疫耐受的诱导： A系小鼠新生期移植B系小鼠的脾细胞，成年期移植B系或C系小鼠皮肤，前者存活，后者排斥。 揭示新生期，体内的免疫细胞处于发育阶段时，可人工诱导其对“非己”抗原产生耐受。 * 小鼠新生期免疫耐受的诱导： A系小鼠新生期移植B系小鼠的脾细胞，成年期移植B系或C系小鼠皮肤，前者存活，后者排斥。 揭示新生期，体内的免疫细胞处于发育阶段时，可人工诱导其对“非己”抗原产生耐受。 * 那么，免疫耐受的形成受到哪些因素的影响呢？ * * * SP细胞的TCR与髓质型上皮细胞、Mφ、DC表达的MHC-肽相互作用，致使能识别自身MHC－自身肽的T细胞克隆被排除或不应答，不能识别的克隆得以增殖的选择过程。　阴性选择排除了与自身抗原-MHC分子结合的，针对自身抗原起反应的细胞克隆，是T细胞形成自身耐受的重要机制。 * 因此，通过凋亡发生的克隆清除是产生中枢免疫耐受的重要机制。克隆清除学说是Burnet 1957年提出的，它指出，胚胎期免疫系统接触的抗原，被视为自身成分，凡是可以识别这些抗原的淋巴细胞克隆被清除，出生后也不会对这些抗原产生正向的免疫应答。 * * Autoimmune regulator (Aire) promotes the ectopic transcriptional activity of a large number of chromosomal locations, thereby enhancing the expression by medullary epithelial cells (MECs) of genes that would normally only be expressed