普通小麦基因枪转化高效受体系统的建立.pdfVIP

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普通小麦基因枪转化高效受体系统的建立

( ) 第 35 卷  第 7 期 西北农林科技大学学报 自然科学版 Vol . 35 No . 7 2007 年 7 月 J ournal of Nort hwest A F U niver sit y (Nat . Sci . Ed . ) J ul . 2007 普通小麦基因枪转化高效受体系统的建立 权军利 ,何玉科 ,陈耀锋 ,李春莲 ,郭东伟 ,韩德俊 ,余  玲 ( 西北农林科技大学 农学院 ,陕西 杨凌 7 12 100) [摘  要]  以小麦幼胚愈伤组织为转化受体 , 以植物表达载体质粒 p RO K2 为外源 DNA , 以蔗糖和甘露醇为渗 透剂 ,研究了愈伤组织生长状态 、渗透剂种类及其处理时间和浓度对基因枪转化效率的影响 。结果表明 ,在采用基因 枪轰击法对小麦幼胚愈伤组织进行转化的体系中 ,受体愈伤的最佳发育阶段为胚性启动前期 ;高渗处理可以使基因 枪转化频率得到明显提高 ,但处理时间过长对愈伤组织的增殖和分化又有明显的抑制作用 ,用蔗糖进行高渗处理对 愈伤组织生长及再生的抑制作用较用甘露醇弱 ;用 0 . 6 mol/ L 蔗糖和 0 . 5 mol/ L 甘露醇分别在轰击前 6 h 和轰击后 18 h 进行高渗处理转化效果均最佳 。文章建立了高效蔗糖高渗基因枪转化受体系统 。 [ 关键词]  小麦 ;愈伤组织 ;受体系统 ;基因转化 ;基因枪 ; 高渗处理 [ 中图分类号]  S512 . 103 . 53 [文献标识码]  A [文章编号]  167 19387 (2007) 070 11706 Est abli shment of efficient acceptor sy st em for gene transformation by microp roj ectile bombardment in whe at QU AN J unli , H E Yuke ,C H EN Yaof eng ,L I Chunlian , GU O Dongwei , HAN Dej un , YU Ling ( ) Col leg e of A g ronomy , N ort hw es t A F Uni vers ity , Yang l i ng , S haanx i 7 12 100 , Chi na Abstact : A n efficient accep tor sy st em for gene t ran sfor mation wa s e st abli shed in callu s of w heat imma t ure embryo s by imp roving t he con ditio n of o smotic t reat ment before bo mbar dment . In t hi s exp eriment , t he accep tor s were f ro m 3 w heat cultivar s includin g Qianj inzao ,Xiaoyan 22 and 9848

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