2 735例女性下生殖道HPV感染检测结果分析论文.docVIP

　　2 735例女性下生殖道HPV感染检测结果分析论文 童郁，邵展，许锴，张德亭 【摘要】 目的 ：了解女性下生殖道人乳头瘤病毒（HPV）感染的型别分布及特点。方法：采用核酸分子快速杂交分型技术对2008年1-12月间在温州医学院温州市第三临床学院妇产科就诊的2 735例女性进行生殖道21种HPV检测并分型。结果：HPV总感染率为38.7%（1 059/2 735），21种HPV亚型（除HPV43型外）均有检出，其中单一型感染率为22.8%(623/2735)，混合型感染率为15.9%(436/2 735)；HPV高危型感染率为31.3%(857/2 735)，HPV低危型感染率为8.9%(244/2 735)。在1 059例HPV DNA阳性感染者中检出率较高的HPV高危型有HPV16型（占17.7%）.freelin速度离心5 min，弃上清，保留管底沉淀物，加入50μL裂解液悬浮沉淀，100 ℃加热10 min，以14 000 r/min速度离心10 min，取上清液按DNA提取试剂盒步骤操作。 1.2.2 PCR扩增：取PCR反应管1支，在管壁上做好标记，分别加入已提取的待测样品DNA 1μL，反应总体系25μL，每次实验必须设置一个阴性对照及阳性对照，处理方法同标本。PCR反应条件为20℃ 10 min，95 ℃ 9 min，尔后循环40次(95 ℃，20 s；55 ℃，30 s；72 ℃，30 s)；72 ℃延伸5 min。 1.2.3 杂交及显色：将PCR产物20μL在95 ℃加热5 min，然后冰水浴至少2 min；让杂交仪预热45 ℃，在杂交孔内放好膜芯片，用1 mL杂交液预处理分子膜；将产物20μL加入杂交液(45 ℃)混匀。加在分子膜上温育10 min，排泵，杂交液冲洗膜3次，设定温度25 ℃，用0.5 mL的封阻液封闭5 min，排泵，加入0.5 mL酶标液，温育4 min；设置温度36 ℃，用溶液a洗膜4次，加入0.5 mL NBT/BCIP显色液3 min，用溶液b洗膜4次，观察结果。当对照膜条PC点出现BIOTIN点和IC 点蓝色斑点时提示PCR、杂交、显色等各个环节操作正常，此时结果真实有效。 2 结果 2.1 HPV感染的型别分布 在2 735例样本中检出HPV DNA阳性病例1 059例，阳性检出率为38.7%，检出高危基因型(HPV16/18/31/33/35/39/45/51/52/56/58/68型)857例，阳性率为31.3%；检出低危型(HPV6/11/42/43/44型)244例，阳性率为8.9%；检出常见亚性（HPV53/66/cp804）177例，阳性率为6.5%。HPV各亚型检出情况见表1。在1 059例HPVDNA阳性感染者中检出率较高的HPV高危型有HPV16型，HPV52型，HPV58型，低危型HPV6型，HPV11型。其中检测过程中发现有多重型感染患者，在检出类型中单一型感染率为22.8%（623/2 735），混合型感染率为15.9%（436/2 735），最多出现达6种型别混合感染，见表2。 2.2 HPV感染的年龄分布 各年龄段HPV感染检出率见表3。HPV感染率在30～40岁年龄段达高峰，50岁后就明显下降，感染人群高峰年龄出现晚，但下降比较快。用SPPS10.0软件列联表资料分析，x2=18.23，P 0.01，各年龄段HPV感染检出率差异有显著性。 3 讨论 世界范围内1/5的肿瘤与感染因子有关，其中子宫颈癌与人乳头状瘤病毒(HPV)的关联最为密切。大量流行病学研究已证实，发生子宫颈癌的必要条件是高危型HPV持续感染。目前，子宫颈癌的一级和二级预防正逐步向预防、检测和控制HPV感染的方向发展。通过大规模人群中HPV感染情况的调查，可以了解以HPV检查为基础的筛查方法在中国女性子宫颈癌预防中的作用，并为HPV疫苗的研制开发提供依据。 性生活是HPV感染的常见传播途径，感染者通常无明显的临床症状，易被人们忽视。据调查，宫颈癌是目前妇女致死的第二大病因，而HPV高危亚型持续感染又是导致宫颈癌变的一个必不可少的因素。年龄是宫颈癌和HPV感染的相关因素。本研究显示：HPV感染率在30～40岁年龄段达高峰，50岁后就明显下降，感染人群高峰年龄出现晚，但下降比较快。30岁后5%～10%的人为高危HPV感染持续状态，有更高的风险患上宫颈癌，从HPV感染到子宫颈癌前病变再到宫颈癌需要一段较长的时间，而子宫颈癌是感染性疾病，可以预防且治愈率高。筛查是现阶段控制和预防子宫颈癌的主要手段，在此时间内，只要定期进行高危型HPV的检查，就可以有效地减少妇女死于宫颈癌的几率。 我们利用杂交技术1-2检测2 735例样本中HPV DNA，检出阳性病例1 059