HPLC法测定骨质宁搽剂中盐酸小檗碱的含量论文.docVIP

　　HPLC法测定骨质宁搽剂中盐酸小檗碱的含量论文 徐世芳 陈爱瑛 姜丽霞 【摘要】 ［目的］建立高效液相色谱法测定骨质宁搽剂中盐酸小檗碱(C20H18ClNO4)含量的方法。 ［方法］C18色谱柱，流动相为乙腈—50mmol·L-1NaH2PO4水溶液（磷酸调PH=2.5）（25∶75），流速1.0mL·min-1,室温, UV 348 nm检测。［ 结果］盐酸小檗碱在 0.106～0.530μg（n=5）范围内线性关系良好（r=0.9999）；方法精密度RSD为0.7%（n=6）。4批样品盐酸小檗碱的含量分别为19.11、18.81、18.83、18.92mg/100mg。［结论］方法专属性强、简便、准确；为该药提供了切实可行的质控方法。 【关键词】 骨质宁搽剂;盐酸小檗碱;含量测定;HPLC Abstract:［Objective］To develop an HPLC method for the determination of berberine hydrochloride in GuZheNing liniment.［Methods］The chromatographic system consisted of Dimonsil C18 column and mobile phase of acetonitrile—50mmol·L-1 sodium dihydrogen phosphate (adjusted PH to 2.5 L·min-1, and the detective .［Results］The calibration curve ethod ple g/100mg, respectively.［Conclusion］The method is selective, simple and accurate, and could be used for the quality control of this preparation. Key L；乙腈为色谱纯，水为重蒸水，其它试剂均为分析纯。 2 实验方法 2.1 色谱条件及系统适用性试验 色谱柱：Dimonsil C18，5μm，4.6mm×150mm，室温；流动相：乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钠溶液（用磷酸调节pH至2.5）（25：75）；流速为1.0mL·min-1；理论板数以盐酸小檗碱计算为7000；主峰与前相邻峰的分离度为2.4；UV检测波长为348 nm；对照品溶液进样10μL,.freelL-1的溶液，再用流动相稀释10倍（1→10），配制成浓度为20μg·mL-1的溶液。 2.2.2 供试品溶液的制备 精密量取本品2mL，置10mL量瓶中，加入流动相至刻度，摇匀，0.45 μm微孔滤膜滤过，即得。 3 方法学考察 3.1.1 专属性 按处方制备不含黄连的阴性样品，按拟定的方法处理样品并测定，在小檗碱出峰区未见干扰峰（见图1—A）。 3.1.2 线性关系及范围 用甲醇准确配制每mL含盐酸小檗碱212μg的对照品溶液，再用流动稀释10倍（1→10），配制成浓度为21.2μg·mL-1的溶液，依次准确进样5、10、15、20、25μL，按上述色谱条件测定峰面积, 以峰面积对进样量（μg）作回归处理,得回归方程和相关系数： Y= 2.1×103+2.955×106X r= 0.99999 结果表明盐酸小檗碱在0.106～0.530μg范围内呈良好线性关系。 3.1.3 重复性试验 取同批样品（批号041102）6份，分别依法处理、进样5μL测定，盐酸小檗碱峰面积的RSD为0.7%，示方法重复性良好。 3.1.4 仪器精密度及样品溶液的稳定性 按上述色谱条件，精密吸取样品含量测定下对照品溶液10μL，重复进样5次，记录对照品峰面积积分值，RSD为0.3%。同时按拟定的方法，取样品（041102）一份，于10小时内，每间隔2小时测定一次，峰面积×105依次为：5.72、5.78、5.79、5.72、5.79，平均值为5.76，RSD为0.6％，溶液稳定。 3.1.5 回收率试验 采用加样回收。精密量取已测含量的供试品（041102）1mL于10 mL量瓶中，加对照品溶液（0.212mg/ mL）600μL，用流动相稀释至刻度，摇匀。共制取6份，依法测定，结果见表1。 表1 回收率测定结果（略） 4 样品测定结果 按所拟定的方法测定了四个批号(041102、041219、041222、041225)的样品，平行取样2份，测定，结果（mg/100mL）分别为：19.11、18.81、18.83、18.92，平均为18.9 mg/100mL。对照和样品的HPLC图见图1—B和图1