HPLCDADELSD法同时测定威灵仙药材中齐墩果酸和常春藤皂苷元的含量论文.docVIP

　　HPLCDADELSD法同时测定威灵仙药材中齐墩果酸和常春藤皂苷元的含量论文 【摘要】 目的 建立以蒸发光散射检测器(ELSD)和二极管阵列检测器(DAD)测定威灵仙药材中齐墩果酸和常春藤皂苷元的高效液相色谱分析方法。 方法 色谱柱： Merck Lichrocart C18柱 (4.0 mm×250 mm，5 μm);流动相: 甲醇水冰醋酸三乙胺(体积比87∶13∶0.04∶0.02);流速：1.0 mL·min-1;柱温：30 ℃;DAD检测波长为210 nm;ELSD蒸发管温度为80 ℃，气体压力为172.375 kPa。结果 常春藤皂苷元、齐墩果酸线性范围分别为1.43～14.3 μg和2.1～21.0 μg;常春藤皂苷元和齐墩果酸在以DAD检测时的加样回收率分别为98.02%、98.94%，RSD分别为2.61%、2.34%;在以ELSD检测时的加样回收率分别为98.72%、100.03%，RSD分别为2.51%、2.22%。结论 本方法简便、重现性好、专属性强，为完善威灵仙药材质量控制标准提供了科学依据。 【关键词】 威灵仙;齐墩果酸;常春藤皂苷元;高效液相色谱法;蒸发光散射检测器;二极管阵列检测器 Abstract:Objective To determine the content of oleanolic acid and hederagenin from Radix Rhizoma Clematidis by RPHPLCELSDDAD at the same time. Methods A Merck Lichrocart C18 column(4.0 mm×250 mm,5 μm) obile phase ethanoline(87∶13∶0.04∶0.02) L·min-1, and the column temperature ; The ELSD drifttube temperature ined by DAD, and 98.72%(RSD=2.51%), 100.03%(RSD=2.22%)determined by ELSD.Conclusion It’s a reliable and accurate method for the quality control of R. Clematidis. Key a Clematidis; oleanolic acid; hederagenin; HPLC; ELSD; DAD 威灵仙来源于毛茛科植物威灵仙chinensis Osbeck、棉团铁线莲Clematis hexapetala Pall. 或东北铁线莲Clematis manshurica Rupri.的干燥根及根茎，为中国药典2005年版收载品种1。具有祛风除湿、通络止痛之功，用于治疗风湿痹痛.freel;TLC法条件要求较苛刻，重现性差;而HPLCUV法测定时，因齐墩果酸属于五环三萜类成分，在紫外204 nm有末端吸收，故受流动相影响较大，分离不够理想，检测灵敏度较低。常春藤皂苷元亦属五环三萜类成分，目前尚未见采用HPLCUV法或HPLCELSD法测定其含量的报道。本文首次采用HPLCELSDDAD法同时测定了威灵仙药材中齐墩果酸和常春藤皂苷元的含量，通过对2种检测器测定结果的对比研究，为威灵仙药材质量控制方法提供实验依据。 1 仪器与试药 erck Lichrocart C18柱(4.0 mm×250 mm, 5 μm)，加预柱;流动相：甲醇水冰醋酸三乙胺(体积比87∶13∶0.04∶0.02);流速：1.0 mL·min-1;柱温：30 ℃;紫外检测器检测波长为210 nm;蒸发光散射检测器的蒸发管温度为80 ℃，气体压力为172.375 kPa。分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各10 μL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，见图1。 A.对照品溶液; B.供试品溶液;1.常春藤皂苷元; 2.齐墩果酸 图1 威灵仙的HPLC图 Figure 1 HPLC Chromatograms of Rhizoma Clematidis 2.2 对照品溶液的制备 分别精密称取齐墩果酸、常春藤皂苷元对照品适量，分别加甲醇制成齐墩果酸质量浓度为2.100 mg· mL-1、常春藤皂苷元质量浓度为1.430 mg·mL-1的对照品溶液。临用时精密量取等量对照品溶液混匀，即为混合对照品溶液。 2.3 供试品溶液的制备 取威灵仙药材粉末(过4号筛)2 g，精密称定，加甲醇50 mL，按照2005年版中国药典“木通含量测定”项下1供试品溶液制备方法处理，即得。 2.4 线性关系考察 精密吸取混合对照品溶液2、5、8、10、15、20 μL