hURAT1基因3′非编码区SNP筛查及与原发性高尿酸血症的关系论文.docVIP

　　hURAT1基因3′非编码区SNP筛查及与原发性高尿酸血症的关系论文 吕森森 吴秀英 韩琳 王瑶 李长贵 【摘要】 目的 在人尿酸盐转运蛋白1（hURAT1）基因3′非编码区（3′UTR区）筛查与原发性高尿酸血症关联的单核苷酸多态性（SNP）。方法 对原发性高尿酸血症病人273例、健康体检者429例（正常对照组），采用酚-氯仿法提取外周血白细胞基因组DNA，特异性引物扩增3′UTR区，并进行基因测序，对基因型及频率进行分析。结果 共检测到3种SNP，分别为1925 G A、del G 1951及G 2174 A，上述SNP位点所组成的基因型频率在高尿酸血症病人组和正常对照组差异无显著性。2例原发性高尿酸血症病人hURAT1基因3′UTR区第1827-1828位2个碱基缺失（del TC 1827-1828），这2例病人的血尿酸水平明显高于其他病人.freelorphisms （SNP） in 3′-untranslated region （3′UTR） of urat1 related to primary hyperuricemia.Methods This study consisted of 273 patients ary hyperuricemia （PH）, and 429 healthy volunteers. DNA peripheral blood and 3′UTR of the URAT1 gene uric acid （573 μmol/L,630 μmol/L VS 499.69±136.08 μmol/L） than the rest in the same group. Conclusion Three SNP sites ia. ［KEY gCl2 1 μL，10 mmol/L dNTP Mix 1 μL，2 μmol/L上下游引物各1 μL，50 mg/L DNA稀释液 1 μL，2.5×106U/L Taq DNA Polymerase 0.5 μL，用去离子三蒸水补齐至20 μL。PCR反应条件：预变性95 ℃ 5 min，然后94 ℃变性40 s、66 ℃退火40 s、72 ℃延伸90 s，35个循环后72 ℃延伸10 min。取5 μL PCR产物经12 g/L琼脂糖凝胶电泳，确定扩增片段为所需目的片段。将PCR产物纯化，根据Sanger双脱氧链终止法原理测序。测序引物分别是5′-GAGTCCTTGGGATGGACACA-3′,5′-CTTGCCAACCCTCTGCTT-3′。 1.3 统计学分析 正态分布计量资料用x±s表示，数据间比较采用t检验及χ2检验。用Hardy-S 1.5［14］统计软件进行处理。 2 结果 2.1 两组生化资料的比较 原发性高尿酸血症病人组三酰甘油（TG）、尿酸、尿素氮（BUN）明显高于正常对照组，差异具有显著性（t=5.639～23.210,P 0.001）。见表1。表1 正常对照组与病人组生化资料比较（略） 2.2 各SNP位点的Hardy-OTOB A, ENDOU H. Renal urate handling: clinical relevance of recent advances［J］. Curr Rheumatol Rep, 2005,7:227-234. ［2］HEDIGER M A, JOHNSON R J, MIYAZAKI H, et al. Molecularphysiology of urate transpor［J］. Physiology, 2005,20:125-133. ［3］GRAESSLER J, AT G, SUSETTE U, et al. Association of the human urate transporter 1 ia in a german caucasian population［J］. Arthitis Rheumatism, 2006,2;（54）:292-300. ［4］YUKIO S, KOJI T, HIDEHIKO O. Association bet uric acid levels in Japanese［J］. Life Sciences, 2006,79:2234-2237. ［5］VAZQUEZ-MELLADO J, JIMENEZ-VACA A L, CUEV-AS- COVAR R S, et al. Molecular analysis of the SLC22A12 （URAT1） gene in patients ary gout［J］. Rheumatology, 2007,46:215-219. ［