ICSI在常规体外受精失败后卵子再受精中的应用论文.docVIP

　　ICSI在常规体外受精失败后卵子再受精中的应用论文 【摘要】 目的 探讨卵细胞浆内单精子注射（ICSI）技术在常规体外受精失败后卵子再受精中的有效性。方法 在12个体外受精失败周期中应用ICSI对未受精的MⅡ期卵子进行再受精，将获得的优质胚胎冷冻保存，选择适当时机复温后移植，移植前均行胚胎辅助孵化。结果 106个未受精的成熟卵子接受ICSI，注射后92个卵子存活。其中75个卵子正常受精，受精率为70.8%（75/106）；12个卵子出现三原核或单原核。69个正常受精卵发生分裂，卵裂率为92.0%（69/75）。最后获得优质胚胎58个，冻融后共移植胚胎38个.freelic sperm injection (ICSI) in human oocyte reinsemination after failure of conventional in vitro fertilization (IVF).MethodsReinsemination via ICSI bryos ong al fertilization onoploidic) oocytes bryos en. One embryo failed to be transplanted, seven embryos aged seriously during transplantation. One patient conceived tically. The pregnancy rate inate the oocytes from the failed fertilization cycles in vitro. It has some efficacy of obtaining pregnancy bryos. ［KEY Ⅱ期卵子即为受精失败的卵子。立即按卵细胞浆内单精子注射的程序进行“再受精”补救。注射后的卵子转移至P1培养液中培养，20 h后观察卵子受精情况。含有2个清晰可见的雌雄原核的卵子为正常受精卵，将其转移至含体积分数0.10血清的新鲜P1培养液中继续培养，24 h后观察受精卵分裂情况，优质胚胎进行冷冻保存。 选取适当时机进行冻融胚胎移植。移植前均行透明带机械性切割以帮助胚胎孵出。移植后2周查 血清βhCG，阳性表示生化妊娠。移植后7周B超检查妊娠囊数目及胎心搏动情况，判断是否为临床妊娠。 2 结 果 12对不孕夫妇共获取118个卵子，其中受精失败的MⅡ期卵子106个，MⅠ期卵子8个，GⅤ期卵子2个，退化卵子2个。对106个成熟的未受精卵均行卵母细胞内单精子注射，注射后存活卵子92个，存活率为86.8%。其中双原核卵子75个，三原核卵子9个，单原核卵子3个，无核卵子5个，正常受精率为70.8%（75/106），异常受精率为11.3%（12/106）。69个正常受精卵发生分裂，卵裂率为92.0%（69/75），最后获得优质胚胎58个。 胚胎冻融后可供移植的胚胎数目为38个，其中11个周期均有可供移植的胚胎，1个周期有7个冻融胚胎均破碎而未予移植。2例获得临床妊娠，其中1例孕3月时流产，1例为单胎临床妊娠足月分娩出正常婴儿，临床妊娠率为18.2%。 3 讨 论 自1978年英国诞生了世界上第一例试管婴儿以来，传统的体外受精胚胎移植术(IVFET)已经发展成为一种比较成熟的辅助生殖技术。严格掌握适应证，可以获得较高的受精率，但是某些难以预料的因素时常使卵子遭遇部分或全部的受精失败。 ICSI以较少的精子需求和较高的受精率成为辅助生殖技术发展史上的又一个里程碑1，适用于严重的少弱精病人，甚或能从睾丸或附睾获取精子的无精子症病人。近年来，已有卵细胞浆内单精子注射使体外受精失败的卵子再受精并获得临床妊娠的报道，但是卵子老化、透明带变性以及胚胎发育与子宫内膜的不同步等因素降低了卵子的再受精率和胚胎种植率。 卵子的自然受精包括精卵融合、卵子激活、第二极体排出、雌雄原核形成等一系列生物学过程。许多因素可以造成体外受精失败，其中最主要的原因是精卵结合障碍，这也是通过ICSI技术使卵子再受精的理论基础。有资料表明，体外受精失败后48 h的卵子仍有再受精的能力，但卵龄越长，再受精率越低2。影响再受精的因素有卵子的老化和再受精的方法，简单重复的第二次受精的成功率仅为8.3%，而ICSI的受精率高达76.9%3。 到目前为止，还没有一种比较好的方法能够直接检测出配子的受精能力。精液的常规检查只能对精子的质量进行初步的评估。去透明带金黄地鼠卵穿透试验也仅能提供部分参考。较为理想的方法是人类配子的透明带结合实验，但是成熟的人卵母细胞较难获得，这种检测方法尚不能广泛开展。鉴于卵细胞浆内单精子注射具有较高的受精率，为避免体外受精失败，有学者提