脾虚证线粒体氧化损伤以及线粒体基因及其表达改变的研究.pdf

组。当归补血汤合四君子汤组与黄芪四君子汤组之间差异显著(PO．05)，黄芪四君 子汤组与四君子汤组之间差异显著(P0．05)，四君子汤组与当归补血汤组之间差异 显著(PO．05)。 3．脾虚模型组大鼠肝、骨骼肌组织中线粒体MDA含量较空白对照组显著升高(PO．01)， 补血汤合四君子汤组黄芪四君子汤组四君子汤组当归补血汤组。当归补血汤合四 君子汤组与黄芪四君子汤组之间差异显著(P0．05)，黄芪四君子汤组与四君子汤组 之间差异显著(PO．05)，四君子汤组与当归补血汤组之间差异显著(PO．05)。 4．脾虚模型组大鼠肝脏及脾脏组织中线粒体膜电位较空白对照组明显下降，差异显著 为：当归补血汤合四君子汤组黄芪四君子汤组四君子汤组当归补血汤组。当归补血 汤合四君子汤组与黄芪四君子汤组之间差异显著(Po．05)，黄芪四君子汤组与四君 子汤组之间差异显著(PO．05)，四君子汤组与当归补血汤组之阿差异显著(PO．05)。 5．经统计脾虚证患者组总突变率为95％，脾胃湿热证组总突变率为100％。脾气虚证 组总突变率为80％，其中同义突变率为33％，缺失率为20％，插入突变率为13％；气 虚不摄血证组总突变率为100％，其中同义突变率为58N，缺失率为0，插入突变率为 17％；脾阴虚证组总突变率为100％，其中同义突变率为0，缺失率为25％，插入突变 率为25N；脾阳虚证组总突变率为100％，其中同义突变率为11％，缺失率为0，插入 突变率为0；脾胃湿熟证组总突变率为100％，其中同义突变率为40％，缺失率为0， 插入突变率为0。 ’ 氨基酸由组氨酸变为亮氨酸、组氨酸变为骆氨酸、脯氨酸变为丙氨酸、异亮氨酸变为 各l例，引起mRNA阅读框架改变，发生率均为6．7％。 ②气不摄血证组8570T插入突变2例，引起mRNA阅读框架改变，发生率17％： A8567G点突变2例、C8552G点突变1例，分别使编码氨基酸由天酰氨酸变为丝氨酸、 丙氨酸变为甘氨酸，发生率分别为17％、8．3％。 ③脾阴虚证组共4例患者，分别为8608C插入突变1例，C8599空缺失突变1例， 由丝氨酸变为脯氨酸。 ④脾阳虚证组C9196T、C9199T点突变各4例，均使编码氨基酸由谷酰氨酸变为 终止密码子，发生率均为44％。 氨酸变为异亮氨酸，发生率分别为30％、10％；G8885A点突变z例，均使编码氨基 n 酸由精氨酸变为赖氨酸，发生率为20％。 6．正常人组的荧光生长曲线里明显阳性；脾虚证各组和脾胃湿热证组荧光反应均弱于 正常人组，差异显著(PO．01)；脾气虚证组的荧光反应弱于脾阴虚证组(因病例数 偏少，未进行统计学比较)和脾阳虚证组(PO．01)；脾气虚证组荧光反应虽弱于脾 胃湿热证组，但无统计学意义(PO．05)；脾阳虚证组荧光反应弱于脾胃湿热证组， 差异显著(P0．01)。 结论； 1．饥饱失常加苦降破气法，是目前塑造脾虚动物模型较理想的方法之一． 2．脾虚模型大鼠组织线粒体中存在氧化抗氧化失衡，提示脾虚证和线粒体氧化损伤发 生密切相关。 3．脾虚证大鼠组织的线粒体膜电位比配的降低说明脾虚证模型存在线粒体功能的损 伤，脾虚证与线粒体膜电位密切相关． 高线粒体膜电位水平效果优于单纯补气健脾法，说明补气健脾方中加入补血养血，活 血行血之剂后，能够明显增强补气的作用。 5．脾虚证患者存在mtDNA碱基点突变、缺失或插入，并造成编码氨基酸组成以及阅读 框架的改变，导致mtDNA损伤，进而基因表达的下降，使得生成功能异常或无功能的 亚基蛋白而直接影响FoF。-ATPase的活性，最终影响细胞的能量代谢，造成细胞能量 供应不足。 关键词：脾虚证，线粒体，氧化损伤，膜电位，ATPase6基因 HI onMi tochondri aOxidate and of Study DamageChanges MitochondriaIDNAandGenetic in ExpressiOl3 I een。。def