芽孢杆菌制剂对小鼠脾淋巴细胞转化功能的影响.pdfVIP

中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第三届第八次学术研讨会论文集 (2006年广州) 3讨论 3.1研究中对淋巴细胞增殖情况的研究采用的是MTT比色法，MTT比色法是一种检测细胞存活和增 殖的方法，MTT能被活细胞内线粒体玻拍酸脱氢酶还原为蓝紫色的结晶formazan,蓝紫色结品的数 量与活细胞数呈正相关。这样通过酶标仪测定OD值后，可以直观看出各组刺激刺激外周血淋巴细 胞的强弱。如果用10%SDS-0.04NHCl，则在加入lOu1MTT(5ug/ul)后4h,测定OD值，需用酶标仪 测OD570，然而把10%SDS-0.04NHCl换成DMSO，每孔加入l00u1的DMSO，使紫黑色结晶完全溶解， 就可以测定OD49。值。 3.2在本实验中，我们设计了不同长度的CpG-ODN，试验结果表明含CpG基元较多的组 (如 CpG-ODN6,CpG-ODN7)对淋巴细胞刺激作用较强。而CpG基元数量达六个CpG-ODN9效果一般。 原因可推测如下:CpG-DNA的免疫刺激作用是通过一个细胞摄入的过程，经吸附内吞，进入酸性内 体，在其中经酸化降解，在10-15min内诱导胞内活性氧 (reactiveoxygenspecies,ROS)的升高， 然后ROS作为一种第二信使，分别经有丝分裂原活化的蛋白激酶(MAPK)和转录调节蛋白如NF-kB, AP-1的信号通路，激活相关基因包括细胞因子基因及一些原癌基因的表达，从而通过这些信号传导 过程而实现其免疫刺激作用:另一方面，过量的ROS具有很高的生物学活性，很容易与大分子反应， 直接损害或通过一系列过氧化链式反应而引起广泛的生物结构的破坏。单位浓度中进入免疫细胞的 ISS就越多，从而引起过量的ROS产生，使免疫细胞正常的氧化与抗氧化作用失衡而对细胞产生损 伤，表现为免疫抑制作用，当然这一推测还需要进一步的工作来证实。因此，我们认为适当长度的 CpGODN可作为有效的佐剂来增强疫苗的免疫效果。 参考文献 (编者略). 芽袍杆菌制剂对小鼠脾淋巴细胞转化功能的影响 祝小，杨慧，潘康成.，吴敏峰 (四川农业大学动物科技学院，动物疫病与人类健康四川省重点实验室，四川雅安，625014) 摘要:研究芽抱杆菌制剂对淋巴细胞转化增强作用，以期了解和评价芽抱杆菌作为饲料添加剂对动 物免疫功能的影响。试验将%只小鼠(雄性)随机分为4组。一组为对照，其余三组在日粮中分别 添加芽抱杆菌Pab04，芽抱杆菌PAS38，抗生素。分别于14,21,28,35,42,49,56,63日龄时 采用MTT比色法检测脾脏T淋巴细胞转化率的动态变化。结果表明，Pab04,PAS38对小鼠的T淋 巴细胞转化功能有增强作用，且这种调节是稳定持久的，芽抱杆菌制剂在饲料添加中的较之抗生素 的优越性。 关键词:芽抱杆菌，淋巴细胞转化，MTT TheEffectoftheBlastisationofMouseSplenicLymphocytebyPreparationofGammaGerm ZhuXiao,YangHui,PanKangcheng Abstract:TocomprehendtheeffectofcellimmunitybyBacillusmacroscopicly.Themousefor experimentwasseparatedrandomlyinto4groupsandleaveoneascontrolgroup.Pab04,PAS38, antibioticswasaddedrespectivelyintothebasicfoodofthreegroups.MTTwasusedtomeasurethe transformationofmousespleniclymphocyteatthedayof14,21,28,35,42,49,56,63.Theresult 作者简介:祝小(1981-)，女，硕士研究生.研究方向动物微生态学. 通讯作者:潘康成(1971-)，男，博士，副教授，E-maiI:pkc@sicau.edu.cn 中国畜牧兽医学会动物徽生态学分会第三届第八次学术研讨会论文集 (2006年广州) indicatedthatPab04andPAS38wasabletoenhancethetransformationofmousespleniclymphocyte，the effectisstableandpersistent.Thisexp