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1.掌握尿蛋白质和尿糖定性试验的原理、 方法及注意事项。 2.熟悉蛋白尿形成的原因。 3.熟悉尿糖检查的临床意义。 4.熟悉尿液酸度的测定方法及意义。 5.了解尿中各种蛋白质分类检验的意义。 酸碱度 蛋白质(protein,Pro) 葡萄糖(glucose,Glu) 酮体(ketone body,Ket) 胆红素(bilirubin,Bil) 尿胆原(urobilinogen,Uro) 血红蛋白(hemoglobin,Hb) 亚硝酸盐(nitrite,Nit) 一.测定方法 指示剂法 pH试带法 滴定法 pH计法 筛检方法,试带易变质。 繁琐,少用。 准确度高,需特殊仪器。 结果粗略,易受干扰。 三.临床意义 1.酸碱平衡状态的观察指标 尿pH降低:代谢性酸中毒、痛风、糖尿病 尿pH增高:代谢性碱中毒、肾小管酸中毒 2.作为尿液其它检查项目的质控指标 二.参考值 pH 5.5~6.5 随机尿 pH 4.5~8.0 正常尿液中只含有极微量的蛋白质(30~130 mg/24h),用常规化学定性的方法不能检测出。所以正常人尿蛋白定性为阴性。 当尿中蛋白排出量>150 mg/24h、或尿中蛋白浓度>100 mg/L时,常规化学定性检查呈阳性,称为蛋白尿(proteinuria)。 干化学试带法 加热乙酸法 磺基水杨酸法 一. 原理 加热可使蛋白质变性,加酸可使蛋白质 接近等电点,促进变性的蛋白质沉淀并消除因加热造成的碱性盐类结晶。 二. 试剂 三. 方法 加热→加酸→再加热→观察结果 5%乙酸溶液 1.尿液2/3管,加热上1/3段至沸腾,观察 有无浑浊。 2.加乙酸溶液2~4滴,再煮沸后立即观察。 阴性(-):清晰透明 微量(±):轻微浑浊 弱阳性(+):白色浑浊无颗粒 阳性(++):浑浊,有明显颗粒 强阳性(+++):大量絮片状沉淀 最强阳性(++++):出现凝块 四. 结果判断 五. 注意事项 1.加酸过多或过少可致阳性减弱或假阴性。 2.无盐或低盐饮食病人可致假阴性。 解决方法:先滴加饱和氯化钠液1~2滴 3.试验完立即判断结果,否则阳性增强。 一. 原理 酸性环境下,磺基水杨酸的磺酸根阴离子与蛋白质氨基酸的阳离子结合成不溶性蛋白盐沉淀。 二. 试剂 三. 方法 清晰尿液1ml,加磺基水杨酸溶液 2滴,轻轻混匀,1分钟内观察结果。 200g/L磺基水杨酸溶液 四. 结果判断 五. 注意事项 2.一些药物可呈假阳性。 3.尿中含高浓度尿酸盐可呈假阳性。 4.尿液pH>9.0可致假阴性。 同加热乙酸法 1.及时判断结果。 蛋白质与指示剂的离子结合生成复合物,引起指示剂发生颜色变化。颜色的深浅与蛋白质含量成正比。 一. 原理 指示剂的蛋白质误差: 二. 方法 三. 结果判断 四. 注意事项 1.试带应干燥、避光保存;注意有效期。 2.pH>9可致假阳性;pH<3可致假阴性。 3.尿色异常影响结果的观察。 4.对球蛋白的敏感性差。 加热乙酸法:操作较烦琐;结果可靠;敏感度150mg/L;电解质少时可致假阴性。确证试验。 磺基水杨酸法:操作简便;敏感度50~100mg/L; 易产生假阳性。用于蛋白尿的筛查。 干化学试带法:操作简便、快速;对球蛋白敏感度较差;试纸易失效。用于健康普查及肾病的筛查。 病理性蛋白尿 肾性 蛋白尿 溢出性蛋白尿 假性 蛋白尿 组织性蛋白尿 生理性蛋白尿 功能性蛋白尿 摄入性蛋白尿 体位性蛋白尿 蛋白定性≤(+),定量≤0.5g/24h 1.功能性蛋白尿 机体在剧烈运动、寒冷、发热、精神紧张等情况下出现的一种暂时性蛋白尿。 2.体位性蛋白尿 直立时出现,卧床休息后消失。 3.摄入性蛋白尿 静脉输注蛋白制剂或进食过多蛋白。 肾小球性蛋白尿 常大于1g/24h,以白蛋白为主。 肾小管性蛋白尿 常小于1g/24h, 多为β2微球蛋白、溶菌酶。 混合性蛋白尿 肾小球和肾小管都有病变。 肾性蛋白尿 溢出性蛋白尿 血浆中低分子量蛋白质明显增加,使原尿中的蛋白质超过肾小管的重吸收能力而大量出现于尿中。 组织性蛋白尿 假性蛋白尿(偶然性蛋白尿) 尿中混入多量血、脓、粘液或生殖系统排泄物而导致蛋白质定性试验阳性。 在尿液形成过程中,肾小管代谢产生的和肾组织破坏分解的蛋白质以及由于炎症和药物刺激泌尿系统分泌的蛋白质。 BJP是免疫球蛋白的轻链。pH4.5~5.5时,加热至56℃时沉淀,继续加热至90~100℃时沉淀溶解,温度降到56℃时恢复凝固。故又称凝溶蛋白。 检测方法: 热沉淀-溶解法 对甲苯磺酸法 免疫法 不灵敏 过筛试验 确证试验 临床意义: 辅助诊断多发性骨髓瘤、巨球
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