不同铂类对CNE2细胞株放射增敏的体外比较实验研究.pdfVIP

不同铂类对CNE-2 细胞株放射增敏的 体外比较实验研究 摘 要 目的：应用细胞克隆形成法，初步比较不同铂类顺铂、卡铂、奥沙利 铂、奈达铂对人鼻咽癌低分化细胞株CNE-2 的放射增敏效果以及其差异 性。方法：培养鼻咽癌低分化细胞株CNE-2 。将指数生长期的细胞按5×103 个/孔细胞密度接种到96 孔板，用WST-1 法进行顺铂、卡铂、奥沙利铂、 奈达铂的细胞毒性检测，计算得出各自IC10 、IC 50 值。将IC10 作为放 射增敏的工作浓度。培养CNE-2 细胞至指数生长期，并进行消化、重悬、 计数，根据不同的射线剂量梯度，在培养皿中加入相应的细胞总数细胞 悬液。实验分为正常对照组、单纯照射组、单纯药物组、药物+照射组， 其中药物+照射组分为四个亚组：顺铂+照射组、卡铂+照射组、奥沙利 铂+照射组、奈达铂+照射组。每组设三个培养皿。在射线照射前 1 天分 别加入工作浓度IC10 的顺铂、卡铂、奥沙利铂、奈达铂，各组分别给予 0、0.5、1、2 、3、4 、6、8、10Gy 照射剂量梯度照射。采用医用直线加 速器，照射条件为６MV X 线照射，剂量率为：412.31cGy/min，SSD 为 100cm，PDD 为97.232%，照射野大小为30×30cm 。接受照射后4 小时， 弃去原培养基，加入等量新的培养基在37℃、0.5%CO 恒温孵育箱中培 2 养 14d，记录不同处理对CNE-2 细胞的杀伤作用，应用计数克隆形成方 法，计算细胞存活分数，克隆形成率，应用单击多靶数学模型进行曲线 拟合作图 （GraphPad Prism5.0 软件）。计算N 、D 、Dq 、SER 、SER 、 0 D0 Dq SERSF2 ，比较单纯照射组和药物+照射组之间，以及各个药物+照射亚组 之间的放射增敏作用的强弱。结果：顺铂、卡铂、奥沙利铂、奈达铂对 CNE-2 细胞的IC50 分别为0.28ug/ml、1.43ug/ml、18.78ug/ml；IC10 分 别为1.94ug/ml 、7.906ug/ml 、1.486ug/ml 、1.3833ug/ml。CNE-2 细胞的克 隆形成率为72% 。单纯照射组的N 值为2.305 ，D0 值为1.478Gy，Dq 值 为1.234 Gy ；顺铂+照射组的N 值为2.547 ，D0 值为1.011 Gy， Dq 值为 0.945Gy，SERD0 、SERDq 、SERSF2 分别为1.462、1.306、1.579；卡铂+照 射组的N 值为2.263 ，D0 值0.994Gy，Dq 值为0.812Gy，SERD0 、SERDq 、 SERSF2 分别为1.487、1.521、1.796；奥沙利铂+照射组的N 值为2.257 ， D0 值为0.969Gy，Dq 值为0.789Gy，SERD0 、SERDq 、SERSF2 分别为1.524、 1.563、1.884；奈达铂+照射组的N 值为2.098 ，D0 值为0.954Gy，Dq 值 为0.707Gy，SERD0 、SERDq 、SERSF2 分别为1.549、1.746、2.070 。结论： 研究结果显示，顺铂、卡铂、奥沙利铂、奈达铂在IC10 低浓度下对鼻咽 癌CNE-2 细胞株均具有放射增敏作用。放射增敏由强到弱为奈达铂，奥 沙利铂，卡铂，顺铂。 关键词：顺铂；卡铂；奥沙利铂;奈达铂；放射增敏；鼻咽癌细胞 Comparative experimental study of the radiosensitization effect of different platinum compounds on CNE-2 Nasopharygeal Carcinoma cell line in vitro Abstract ：Objective：To study and compare the radiosensitization of different platinum