参芪王浆养血口服液中10羟基2癸烯酸(10HAD)的含量测定论文.docVIP

　　参芪王浆养血口服液中10羟基2癸烯酸(10HAD)的含量测定论文 【摘要】 目的：测定参芪王浆养血口服液中10羟基2癸烯酸(10HAD)的含量。方法：用高效液相色谱法，以ODSC18柱(150mm×4.5mmID,.freel)为固定相，甲醇0.03mol/L磷酸二氢钠溶液(用磷酸调pH2.5-2.7)(50：50)为流动相，检测波长为210nm。结果：10羟基2癸烯酸在0.225～0.675μg范围内呈现良好线性，相关系数r=0.9999。平均加样回收率95.27%，RSD为1.36%(n=6)。结论：本方法简便、准确、重现性好。 【关键词】 参芪王浆养血口服液；10羟基2癸烯酸；高效液相色谱法； 参芪王浆养血口服液是由人参、蜂王浆、黄芪、当归、蜂蜜及辅料组成。本文以参芪王浆养血口服液中的主要有效成分10羟基2癸烯酸为指标，采用高效液相色谱法，以甲醇、磷酸二氢钠溶液为流动相.freelasil C18柱(150mm×4.6mmID，5μm)；流动相：甲醇0.03mol/L磷酸二氢钠溶液(用磷酸调pH2.5～2.7)(50：50)为流动相，检测波长：210nm；柱温：30℃；流速1.0ml/min；灵敏度：0.08AUFS。 3 线性范围的考察 精密称取10羟基2癸烯酸对照品适量约10mg，置25ml容量瓶中，加甲醇稀释制刻度，摇匀，再精密吸取1ml置10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，配成每1ml含40μg的溶液，精密吸取10羟基2癸烯酸(45μg/ml)对照品溶液5、7.5、10、12.5、15μl注样。记录色谱图，测定其峰面积，结果见表1。 表1 10羟基2癸烯酸对照品测定结果（略） 结果表明，在0.225-0.675μg范围内，10羟基2癸烯酸峰面积值与进样量有良好的线性关系。 4 精密度试验 精密吸取样品(061201)供试液10μl，重复进样5次，测定其峰面积，10羟基2癸烯酸峰面积值的RSD=0.83%,结果平均值为2106148，RSD为0.83%(n=5)，试验结果表明，精密度良好。 5 稳定性试验 取样品(061201)供试液分别于0、4、8h，进样10μl，测得样品中10羟基2癸烯酸峰面积值的RSD=0.69%，结果表明，样品供试液在8h内稳定性良好(n=5)。 6 重现性试验 按拟定的含量测定方法，对同一批样品(061202)制备样品供试液，测得峰面积值并计算含量，其10羟基2癸烯酸峰面积值的RSD=1.40%；10羟基2癸烯酸含量的RSD=1.36%。试验结果表明，本方法重现性良好。 7 回收率试验 精密量取已知含量的样品(061203)10ml，分别加入10羟基2癸烯酸(0.853mg/ml)对照品溶液4.0、5.0、6.0ml按上述样品制备方法和色谱条件，制备加样回收供试品溶液并注入高效液相色谱仪，计算回收率，结果平均回收率为95.27%，RSD为1.36%。结果表明，回收率在95%～100%之间，回收良好。 8 样品测定 对照品溶液的制备：精密称取10羟基2癸烯酸对照品适量，加甲醇制成每1ml中含40μg的溶液，即得。供试品溶液的制备：精密量取供试品20ml，置25ml容量瓶中，加入1mol/L盐酸溶液3ml，加水至刻度，充分摇匀，放置30min。精密吸取该溶液1ml，置分液漏斗中，加水20ml，用二氯甲烷萃取4次每次20ml，合并二氯甲烷，减压回收二氯甲烷，残渣用甲醇定容至10ml，摇匀，溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，即得。测定法：分别精密吸取10羟基2癸烯酸(42μg/ml)对照品溶液与10批样品供试液各10μl，按上述色谱条件测定，结果见表2。 表2 样品测定结果（略） 9 讨论 9.1 检测波长的选择 利用UV2401PC型紫外分光光度仪，10羟基2癸烯酸对照品，在200-400nm波长下进行紫外扫描，结果在210nm波长处有最大吸收，因此选择210nm为检测波长。 9.2 提取溶剂的选择 10羟基2癸烯酸溶于氯仿、乙醚、石油醚、二氯甲烷等。曾用4种提取溶剂分别进行萃取，在相同条件下进行测定，结果每1ml样品中10羟基2癸烯酸含量分别为0.38，0.32，0.31，0.42mg。用二氯甲烷萃取时，分层快，界面清晰，有利于快速测定，而且含量最高，故选用二氯甲烷为提取溶剂。 9.3 提取次数考察 照样品测定项下的测定方法，分别用水饱和醋酸乙酯提取1，2，3，4，5，6次依法测定。测定结果分别为0.28，0.35，0.40，0.43，0.42，0.43mg/ml，结果表明提取4次以后，10羟