参蛤益肺胶囊对慢性阻塞性肺疾病大鼠炎症因子的影响论文.docVIP

　　参蛤益肺胶囊对慢性阻塞性肺疾病大鼠炎症因子的影响论文 .freelmatory mediators in the aironary diserse (COPD). Methods 60 SD rats ly into normal group, COPD model group, Jinshuibao control group and Shengeyifei groups. The COPD model oking and infusing lipopoly- saccharide (LPS). The level of interleukin-8 (IL-8) and tumor necrosis factor α (TNF-α) in bronchoalveolar lavage fluid (BALF) easured and the pathology of the airent on the rats. Result The levels of IL-8 and TNF-α in Shengeyifei groups odel group (P 0.01),.freelmation in the airmation in aira公司提供,IL-8、TNF-α放免试剂盒由北京科美东雅生物技术有限公司提供,批号050525。放射免疫γ-计数器(SN-682型),中国科学院原子核研究所日环仪器厂产。徕卡2135型石蜡切片机,德国徕卡公司生产。Olympus bxso型显微镜、Olympus20型显微照相设备,日本Olympus光学工业株氏社生产。 2 实验方法 2.1 造模及给药 大鼠实验前适应性饲养1周,随机分为6组,即正常对照组、COPD模型组、金水宝对照组及参蛤益肺(以下简称参蛤)低、中、高剂量组,每组10只。参照文献2烟熏加LPS造模,除空白组外,余5组各鼠第1、14天用4%水合氯醛(10 mL/kg)腹腔注射麻醉后,予气管内注入LPS各200 μg/200 μL,第2～13、15～28天每日上午在自制烟熏箱(43 cm×32 cm×24 cm)内熏香烟0.5 h(每次每箱4支,大前门牌,上海卷烟厂生产,每支含焦油15 mg、烟气烟碱量1.1 mg)。各组第2～13、15～28天每日下午给予大鼠灌胃处理,参蛤各组用参蛤方悬液分别按0.25、0.5、1 g/(kg?d)灌胃,金水宝对照组按0.5 g/(kg?d)灌胃,正常组和模型组分别用等量生理盐水灌胃。 2.2 BALF的收集、检测 实验第29天处死大鼠,完整取肺及气管,将静脉套管针插入左主支气管,钳夹右总支气管,用3 mL生理盐水灌洗左肺并回收,反复2次,总回收量约为4 mL,离心,取上清,保存于-20 ℃冰箱中待检。用放免法检测BALF中IL-8、TNF-α水平(按试剂盒说明书操作)。 2.3 病理组织学观察 于各鼠右肺中叶取材,浸泡于10%甲醛液中固定12 h,经梯度乙醇脱水,二甲苯透明,常规石蜡包埋,切片,苏木精-伊红(HE)染色。镜下观察支气管管腔、黏膜、杯状细胞及肺泡等情况。 2.4 统计学方法 计量资料用x±s表示,各组间均数比较用t检验。 3 结果 3.1 各组IL-8、TNF-α水平比较 (见表1)表1 参蛤益肺胶囊对COPD大鼠BALF中IL-8、TNF-α的影 响(略)注：与正常对照组比较,▲▲P 0.01；与COPD模型组比较,*P 0.05,**P 0.01；与金水宝组比较,#P 0.05,##P 0.01。 3.2 支气管及肺泡病理组织学观察 与正常对照组相比,模型组见明显支气管黏膜水肿变形增厚,管腔变窄,杯状细胞明显增多,管壁见有较多炎性细胞浸润,肺泡壁有断裂、肺泡扩大融合现象,符合慢性支气管炎、阻塞性肺气肿病理学特征。与模型组相比,参蛤治疗组支气管黏膜上皮结构尚正常,无明显水肿变性,有少量杯状细胞增生,管壁各层浸润的炎性细胞相对较少；肺泡壁变薄、断裂、肺泡腔扩大融合的范围和程度较轻,其中参蛤中剂量组减轻程度较为明显。金水宝对照组病理改变减轻程度不明显。 4 讨论 本研究结果表明,COPD大鼠模型BALF中IL-8、TNF-α水平明显高于正常对照组(P 0.01),提示该两种细胞因子与COPD气道炎症及其病理改变密切相关。中药复方参蛤益肺胶囊可降低BALF中IL-8、TNF-α水平,表明该药具有一定的抑制COPD气道炎症的作用；气道病理组织学观察也表明,该药能减轻模型大鼠气道炎症及其结构改变。 气道慢性非特异性炎症是COPD主要的病理学特征,管腔内炎症特点则以中性粒细胞浸润(PMN)为主,作为PMN的强趋化剂和活化剂,IL-8通过促使PMN脱颗粒、释放弹性蛋白酶和引发PMN的呼吸爆发、释放大