畜禽育种目标和方法-培训课件.ppt

转基因畜牧业对一些疾病的控制 基因 功能 溶葡球菌酶基因 预防奶牛的乳房炎 Prion 基因失活 避免疯牛（羊）病 RNAi（干扰）技术 预防和控制疯牛（羊）病，鸡的鸡瘟，动物的口蹄疫 病毒或细菌蛋白质基因 预防病毒和细菌感染 转基因畜牧业与人类疾病的治疗和预防 基因 功能 人类 疾病 的预防 人乳铁蛋白、人溶菌酶 、人乳清白蛋白基因 人源化（牛）奶 乙肝抗原基因 预防乙肝 人类 疾病 的治 疗 人抗凝血酶III（ATIII）基因 抗凝血酶III缺乏症和抗血栓 其他抗凝血因子（VIII和IX等）基因 抗凝血和血栓 胰岛素基因 治疗糖尿病 胶原蛋白 用手手术缝合 组织纤维蛋白溶酶原激活因子基因 治疗组织纤维化 白细胞介素II，XII基因 增加白细胞的生成 丁酰胆碱酯酶基因 对付神经毒气弹的强力解毒药 人血清蛋白基因 用于输血 干扰素基因 提高人体免疫力 抗原基因 预防病毒和细菌性疾病 蛋白质C1抑制因子基因 器官移植 技术路线 转基因体细胞克隆技术路线图 （3）转基因育种的技术难点 —目的基因的转入 —转入基因的表达 —表达基因的遗传 （4）什么时候才能育出转基因动物品种 猪？ 牛？ 羊？ 基因的纵向传递还是横向传递？ 成本？ 转基因动物的制作技术 原核期胚胎的显微注射 逆转录病毒载体注射MII期的卵母细胞 精子头与外源DNA合并注射卵母细胞 体细胞核移植技术制作转基因动物 逆转录病毒载体感染发育早期的动物胚胎 原始生殖细胞技术 精子载体方法 胚胎干细胞技术 iPS OR ES 2. 细胞克隆 体细胞 转基因羊的研究难度极大，且成功率低。难度在于：家畜受精卵的雄原核并不像实验动物那样清晰可见，显微注射的命中率低；注射的外源基因的整合率低；移植胚胎的受孕率低。 针对上述困难，以黄淑帧教授为主的课题组积极探索，并在技术路线上取得了三大突破：攻克了试管羊技术，精确掌握了羊胚胎的发育规律以及受精卵显微注射的最佳时机，使注射后的受精卵成活率达到百分之九十五以上；通过胚胎分子鉴定，挑选有外源基因整合的胚胎进行移植，使整合率在理论上提高到百分之百；采用非手术胚胎移植技术，大大减少了对受体母羊的损伤，使受孕率达到百分之七十。 克隆羊和转基因羊有什么不同呢？ 简单的说，克隆羊使用的是不受精的卵细胞，转基因羊用的是受精胚胎。 前者突破了有性繁殖的框架，后者仍然是靠两性繁殖所得到的卵细胞，前者是“复制”原动物体，后者是动物体获得外源基因并把它遗传给一代、两代……，它不是复制自身。 异种器官移植 乳腺生物反应器 转基因育种 血液 器官 药用蛋白 生长 羊毛 营养保健 Hemoglobin DNX Biotherapeutics Inc Heart Imutran Limited Kidney Nextran a1-Antitrypin PPL Therapeuticals plc Antithrombin III Genzyme Transgenic Corp Lactoferrin Pharming B.V. Glycoconjugates Ross Products Corp GH, IGF-I Pig Breeding, Bresgen Ltd MP, IGF-I Sheep Breeding, AgRes. TRANSGENIC ANIMALS Where Is the Potential for Application 基因 怀孕产犊 胚胎移植 转基因牛 代孕母亲 表达检测 分子筛选 微注射 胚胎培养 随机整合 传统微注射技术生产转基因动物示意图 总效率0.5% 核供体动物 体细胞 细胞培养 卵供体动物 未受精卵 除去卵核 细胞融合 克隆胚胎 胚胎移植 无核卵子 代孕母亲 代孕母亲 与核供体遗传相同的克隆牛 动物体细胞克隆提供解决方案？ 核供体动物 体细胞 细胞培养 卵供体动物 未受精卵 除去卵核 细胞融合 克隆胚胎 胚胎移植 无核卵子 代孕母亲 代孕母亲 基因组经过随机整合修饰的转基因克隆牛 细胞筛选 基因整合 阳性细胞扩群 目标基因 基因转移 随机整合 转基因克隆提高了转基因效率 但未解决表达效率和时空表达 依赖于基因同源重组的转基因克隆 可以同时提高基因整合和表达效率 核供体动物 体细胞 细胞培养 卵供体动物 未受精卵 除去卵核 细胞融合 克隆胚胎 胚胎移植 无核卵子 代孕母亲 代孕母亲 基因组经过同源重组修饰的转基因克隆牛 细胞筛选 基因整合 目标基因 基因转移 同源重组 目标基因 基因转染 药物筛选 怀孕产犊 核卵融合 胚胎移植 克隆胚胎 繁育扩群 转基因克隆牛 基因高效表达 代孕母亲 工厂化生产牛群 市场销售 全球市场营销 体细胞 核