生化第一次作业.docVIP

现有一个六肽，根据下列条件，作出此六肽的氨基酸排列顺序。 （1）DNFB反应，得到DNP-Val； （2）肼解后，再用DNFB反应，得到DNP-Phe； （3）胰蛋白酶水解此6肽，得到三个片段，分别含有1个、2个和3个氨基酸，后两个片段呈坂口反应阳性； （4）溴化氰与此六肽反应，水解得到两个三肽，这两个三肽片段经DNFB反应分别得到DNP-Val和DNP-Ala。 答案：Val-Arg-Met-Ala-Arg-Phe 课后练习： 1.有人纯化了一个未知肽，其氨基酸组成为：Asp 1，Ser 1，Gly 1， Ala 1， Met 1，Phe 1和 Lys 2。又做了以下一系列分析，结果如下： （1）DNFB与之反应再酸水解得DNP-Ala； （2）胰凝乳蛋白酶（CT）消化后，从产物中分出一个纯四肽，其组成为：Asp 1，Gly 1，Lys 1，Met 1，此四肽的DNFB反应降解产物为DNP-Gly； （3）胰蛋白酶（T）消化八肽后又可得到组成分别为Lys 1，Ala 1，Ser 1及Phe 1，Lys 1， Gly 1的两个三肽和一个二肽。此二肽被CNBr处理后游离出自由天冬氨酸。 请列出八肽全顺序。 2.某天然9肽，其组成为：Gly 2，Phe 2，Tyr 1，Met 1，Asp 1，Arg 1和Pro 1，经胰凝乳蛋白酶（CT）水解后可分得一个五肽和一个四肽，四肽的组成为：Phe 1，Tyr 1，Gly 1和Pro 1。此九肽的CNBr处理产物再经阳离子交换树脂层析并洗脱得一个组成为Arg 1，Phe 1和Gly 1的三肽，此九肽如经胰蛋白酶（T）水解可得Phe，如用DNFB反应再水解测得DNP-Tyr。请写出九肽的全部顺序。 * * 切断Met羧基端 CNBr裂解 断裂Asp羧基端 稀酸水解 Ala Ser Thr 弹性蛋白酶 芳香族AA 胰凝乳蛋白酶 Lys Arg 胰蛋白酶 芳香族 Met Leu 胃蛋白酶 Pro,Pro-OH C-端测序 羧肽酶法 Asn Gln Cys Arg C-端第一个AA 肼解法 N-端测序 氨肽酶法 N-端第一个AA DNS法 不可测 可测 * 蛋白质测序中的暗示（hint） * * N-端第一个AA PITC Pro，Pro-OH N-端第一个AA DNFB 两个以上的肽键 双缩脲反应 Pro，Pro-OH黄色 AA呈蓝紫色 茚三酮反应 His（咪唑基），Tyr Pauly反应 Arg（胍基） 坂口反应 Trp（吲哚基） 乙醛酸反应 Tyr（酚基） Millon反应 Phe，Tyr（苯环） 黄色反应 不可测 可测 *