慢性阻塞性肺疾病患者诱导痰IL8、TNFα水平和炎症细胞的分布论文.docVIP

　　慢性阻塞性肺疾病患者诱导痰IL8、TNFα水平和炎症细胞的分布论文 【摘要】 目的 比较稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)老年患者、老年健康吸烟者和老年健康非吸烟者痰液中IL8、TNFα水平和炎症细胞组成的差异，进而探讨IL8、TNFα、中性粒细胞与吸烟的相关性以及COPD气道炎症的性质。 方法 98例老年研究对象分为3组：COPD组38例、健康吸烟组（HS）30例、健康不吸烟组（HNS）30例，诱导痰方法收集痰液，细胞分类及计数，并用酶联免疫吸附法(ELISA)测定痰上清液中IL8、TNFα浓度。结果 COPD组痰液中IL8,、TNFα、中性粒细胞百分比明显高于健康吸烟组及健康不吸烟组；COPD组痰液中IL8、TNFα水平与中性粒细胞百分比呈显著正相关性（r=0761,r=0495）；健康吸烟组痰中IL8水平与中性粒细胞百分比亦呈显著正相关性（r=0544）。结论 IL8和TNFα和中性粒细胞共同参与了吸烟者COPD气道炎症反应。 【关键词】 慢性阻塞性肺疾病；气道炎症；IL8；TNFα；中性粒细胞 约80%～90%的慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者是吸烟者，但是仅有20%的吸烟者发展为COPD〔1〕，提示对COPD易感性不同的人群，其气道对同样的香烟刺激的反应性不同。目前认为.freell/min），雾化时间为5～10 min。将病人咳出的痰收集于无菌干燥的培养皿中，挑选出黏液部分放入无菌干燥试管中称重，加入4倍量01%DTT（二硫苏糖醇），37℃水浴15 min，以有效溶解痰液，再加入4倍量磷酸盐缓冲液（001 mol/L pH74 PBS）充分洗涤细胞5 min，2 000 r/min离心10 min。离心后的上清液-70℃保存待测，沉淀留作痰细胞学检查。 123 痰液细胞计数及分类 制备痰细胞学涂片2～3张，室温下自然风干，做HE染色。光学显微镜下进行细胞计数及分类，至少计数300个细胞，分类计数中性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞及嗜酸性粒细胞，检查两张涂片，取其平均数，得出各种细胞所占百分率。 124 痰上清液IL8、TNFα浓度的检测 IL8、TNFα采用酶联免疫吸附法（ELISA）。操作步骤按试剂盒(美国GeneMay公司)说明书进行，敏感度为16 pg/ml。 13 统计学分析 数据均以x±s表示，组间比较分析用t检验或t′检验、χ2检验。数值变量之间的依存关系用相关系数r表示，并应用t检验，使用统计学处理软件医用CS103、Microsoft excell处理原始数据，并图示其相关性。 2 结 果 21 COPD组与HS组病例资料比较 见表1。表1 COPD组与HS组病人资料比较(略) 22 炎症细胞计数与分类 痰液中的细胞主要是中性粒细胞和巨噬细胞，嗜酸性粒细胞、淋巴细胞。COPD组诱导痰中性粒细胞百分比明显高于HS组（t=834）及HNS组（t=1115 ），差异有显著性（P＜001）。HS组与HNS组痰中性粒细胞的百分比相比较，差异有显著性(t=348,P＜001)。各组间嗜酸性粒细胞和淋巴细胞分类差异无显著性（见表2）。表2 各组痰液细胞分类的比较(略) 23 各组间诱导痰上清液IL8水平比较 COPD组明显高于HS组和HNS组，差异有显著性（t=397,t′=315,P＜001）；HS组明显高于HNS组，差异有显著性（t′=204,P＜005）(见表3)。在COPD组内，中、重度患者与轻度患者比较，差异无显著性〔(13641±3095) ng/L vs (12029±3269) ng/L〕。 健康吸烟组内，吸烟指数＞400支/年的患者组与吸烟指数＜400支年组比较，差异无显著性〔(10571±2757) ng/L vs (8972±2674) ng/L，t=161,P＞005)〕。 24 各组间诱导痰上清液TNFα水平的比较 COPD组与HS组和HNS组相比较，差异有显著性（t′=203,t′=232,P＜005）；HS组与HNS组相比较，差异无显著性意义(见表3)。 COPD组内不同病情程度的患者，中、重度患者与轻度患者比较，无显著性差异〔(518±238) ng/L vs (445±209) ng/L〕。 25 各组诱导痰IL8、TNFα和中性粒细胞比率与肺功能之间的相关性分析 COPD组诱导痰IL8水平与中性粒细胞比率之间呈显著正相关（r=076,t=591,P＜0001）。HS组痰IL8与中性粒细胞比率之间呈显著正相关关系（r=056,t=3649,.freelonary disease〔J〕Am J Respir Cr