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３. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞 诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞， 在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ） ①淋巴细胞　 ②小鼠骨髓瘤细胞　 ③B淋巴细胞自身融合细胞　 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞　 ⑤杂交瘤细胞 A． ②④ B．①③⑤　　 C． ①②③④ 　 D．②③ C 4、下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的实验方案 (2)、该方案能达到预期效果吗？为什么？ (4)、图中B为________过程，常用_________作为诱导剂，该细胞继承___________的遗传特性，既能__________,又能___________。 (1)、该实验方案的目的是__ ________ (3)、A是从小鼠的脾脏中取得_______,该细胞能够产生______ (5)、C过程指细胞培养，该过程包括_____培养和_____培养两个阶段，其中_____代以内的的细胞属于细胞株。 制备单克隆抗体 B细胞 抗体 细胞融合 灭活病毒 双亲细胞 分泌抗体 无限增殖 原代 传代 50 B 体外培养 骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞 足够数量的细胞群 注射到 小鼠腹腔 A C 附录： 动物体细胞核移植技术和克隆动物 动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核,移如入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中.使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体. 胚胎移植技术 胚胎移植的基本程序如下（以牛胚胎移植为例） 核移植技术 1.克隆羊培育过程 黑面绵羊去核卵细胞 白面绵羊乳腺细胞核 细胞核移植 重组细胞 电脉冲刺激 早期胚胎 胚胎移植 另一头绵羊的子宫 妊娠、出生 克隆羊“多利” 体细胞核移植技术的应用前景 体细胞核移植技术用于人类疾病治疗 体细胞核移植技术存在的问题 微信红包群 微信红包群 衍痋耶 细胞工程简介 —动物细胞工程 秦安一中生物教研组 康平心 二 动物细胞工程 本节聚焦: （1）动物细胞培养的过程、条件及应用 （2）动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用 （3）动物体细胞核移植技术克隆动物的过程及应用前景 重点与难点： （1）动物细胞培养的过程及条件 （2）单克隆抗体的制备和应用 （一）、动物细胞培养 1.发展简史: 20世纪初，人们不知道神经纤维是由神经细胞的细胞质向外突出形成的，还是由神经细胞周围的其他细胞融合而成的。生物学家们就这个问题展开了激烈的争论。1907年，美国生物学家哈里森(Harrison)从蝌蚪的脊索中分离出神经组织，把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培养。蝌蚪的神经组织存活了好几周，并且从神经细胞中长出了神经纤维。哈里森的实验不仅解决了神经纤维的起源问题，而且开创了动物组织培养的先河。此后，在许多科学家的不懈努力下，动物组织培养不断改进并逐渐发展成为动物细胞培养。 用培养的人细胞构建的人造皮肤 2、动物细胞培养的概念： 动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖. 3、动物细胞培养过程： 取材：动物胚胎或出生不久的幼龄动物的 器官或组织。 应用 A、大规模生产蛋白质生物制品：病毒疫苗、 干扰素、单克隆抗体等 B、医学上用于自体细胞的扩增、移植，如烧伤病人的皮肤移植 C、培养动物细胞检测有毒物质 原代培养 传代培养 细胞株 细胞系 过程： 相关概念: 原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。 细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部 分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40-50代，这种传代细胞为细胞株。 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。 动物细胞的培养过程 幼龄动物 取动物器官 和组织 剪碎组织 胰蛋白酶处理 细胞培养 单个细胞 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础 在动物细胞培养过程中，为什么要用胰蛋白酶对取出的动物组织进行处理 胰蛋白酶处理动物组织，可以使动物组织细胞间的胶原纤维和细胞外的其他成分酶解，获得单个细胞。 4.动物细胞培养的条件: (1).无菌无毒的环境 (2).营养 (3)