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三、凝血酶时间测定 TT测定主要反应凝血共同途径纤维蛋白原转变为纤维蛋白的过程中,是否存在异常的抗凝现象(抗凝或纤溶亢进)。 【原理】 在受检血浆中用加入“标准化”凝血酶溶液,直接将纤维蛋白原转变为纤维蛋白,测定血浆开始凝固所需的时间。 【方法学评价】 TT测定方法类似PT、APTT测定,有手工法和血液凝固仪法,均采用疑固法原理。 【质量控制】 血液标本采集、储存温度和时间、抗凝剂用量、仪器和试剂、实验温度等均对TT试验的准确性产生重要的影响,对实验条件的要求基本与PT测定相同。 【参考值】 每个实验室应建立所用测定方法相应的参考值。一般16~18s。 【临床意义】 受检TT值延长超过正常对照3s为延长。 TT测定主要用于检测有无纤维蛋白原异常、以及是否发生纤溶、存在抗凝物的情况。 延长见于:低(无)纤维蛋白原血症(Fg低于700~1 000mg/L)、遗传性或获得性异常纤维蛋白原血症;血FDP增高(DIC),存在肝素和类肝素物质 四、纤维蛋白原含量测定 直接测定血浆Fg含量,可反映Fg增高或减低的实际状态。 【检测原理】 【方法学评价】 1、 Clauss法 此法为功能检测,操作简单、结果可靠,故被WHO推荐为测定Fg的参考方法。 当凝血仪通过检测PT方法来换算Fg浓度时,如结果可疑,则应用Clauss法复核确定。 2.免疫法、比浊法、化学法操作较繁,均非Fg功能检测法,故与生理性Fg活性不一定总是成平行关系。 【质量控制】 Clauss法参比血浆必须与检测标本同时操作测定,以便核对结果;如标本中存在肝素、FDP或罕见的异常Fg,则Clauss法测定的Fg含量可假性减低,因此,需用其他方法核实。 【参考值】 ①成人2—4g/L。 ②新生儿:1.25~3g/L。 【临床意义】 Fg含量测定主要用于出血性疾病(包括肝脏疾病)或血栓形成性疾病的诊断以及溶栓治疗的监测。 1.增高 Fg是急性时相反应蛋白,也是红细胞沉降率增快最主要的血浆蛋白,在组织坏死和炎症时、妊娠和使用雌激素时。Fg水平超过参考值上限是冠状动脉粥样硬化心脏病和脑血管病发病独立的危险因素之一。Fg增高还见于糖尿病、恶性肿瘤等 2、减低 见于:肝脏功能受损的疾病如肝硬化、DIC、药物、遗传性异常Fg血症或无Fg血症(极少见)。 3、溶栓治疗监测 Fg测定可用于溶栓治疗(如用UK、t—PA)、蛇毒治疗(如用抗栓酶、去纤酶)的监测。 五、D—二聚体测定 D—二聚体是纤溶酶降解交联的纤维蛋白的产物,对继发性纤溶的诊断具有特异性。 【检测原理】 1.胶乳凝集法 抗DD单克隆抗体包被于胶乳颗粒上,与受检血浆中存在的DD产生可见的凝集反应。 2.酶联免疫吸附试验(enzyme—linked immunosorbent assay,ELISA)法 【方法学评价】 1.胶乳法 检测结果简便、快速,可由肉眼判断。使用血浆比使用血清更方便和更准确。检测时间短(反应时间3min)。 2.ELISA法 灵敏度高,但检测时间长。 【质量控制】 均需作阴性和阳性对照试验。 【参考值】 阴性或0.25mg/L [临床意义] D—D测定主要用以诊断继发性纤溶亢进症。 1.阳性: ①继发性纤溶亢进症:DIC ②组织纤溶酶原激活物的溶纤疗法。 ③动脉或静脉血栓性疾病 ④其他疾病:如妊娠(尤其产后)、恶性肿瘤、手术等 2.原发性或继发性纤溶亢进症鉴别诊断 由于纤维蛋白原及其降解产物均不与DD抗体反应,因此,DD阳性可认为是继发性纤溶如DIC或其他血管内血栓形成的证据。 DD检测是鉴别原发性和继发性纤溶的良好指标:在血栓形成中的灵敏度达90%~95%,虽特异性仅为30%~40%,但阴性预测值可达95%以上,即DD检测如阴性,则基本可排除血栓形成。 弥散性血管内凝血 1.DIC的概念 DIC是由多种致病因素(严重感染、组织损伤、恶性肿瘤、病理产科、肝脏疾病等其他病因引起的获得性血栓(高凝期)—出血(继发低凝、纤溶亢进)综合征。 2.DIC的实验室诊断 ①PLT:常减低,通常认为,PLT动态性减低更有助于诊断。 ②PT:延长占70%~90%。 ③Fg:DIC高凝期可增高(大于4.0g/L),在低凝期和纤溶亢进期常减低 ④FDP:灵敏度达85%~100%,准确性达75%。虽然,FDP超过20mg/L(肝病时需超过60mg/L)才有诊断价值。 DIC确诊试验: DD阳性或含量明显增高,是诊断DIC特异性指标,准确率达93%;DD阳性也是排除原发性纤溶症的重要试验。总之,DIC实验室诊断中,必须用筛检试验作动态观察,当PLT和Fg进行性减低,而FDP和DD进行性增高时则更有诊断意义。 自动血液凝
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