第三章,细胞的全能性与遗传变异.pptVIP

第三章 细胞全能性与遗传变异 细胞全能性 形态建成 遗传变异 目的与要求 掌握细胞离体培养的基本理论基础； 理解培养条件下组织细胞脱分化和再分化的调控原理； 了解体细胞胚形成过程及其与合子胚的差异； 了解细胞离体培养遗传变异。 第一节细胞全能性及其表达 细胞全能性概述 细胞脱分化 细胞分化 二、培养条件下的细胞脱分化 1．细胞脱分化过程中生理活动与细胞结构的变化 总体上包括：细胞质显著变浓，大液泡消失，核体积增加并逐渐移位至细胞中央，细胞器增加。 第一阶段为启动阶段，表现为细胞质增生，并开始向细胞中央伸出细胞质丝，液泡蛋白体出现； 第二阶段为演变阶段，此时细胞核开始向中央移动，质体演变成原质体； 第三阶段为脱分化终结期，细胞回复到分生细胞状态，细胞分裂即将开始。 2．细胞脱分化的调控机理 细胞周期调控 激素的作用 PSK的调控作用 染色体变化 周期调控蛋白 三类： Cyclin(周期蛋白A，B，C，E) CDK---cyclin-depended kinase（1，2，4） CKI--- cyclin-depended kinase inhibitor PSK调控作用 1996年，首次发现PSK a, PSKb PSKa在低细胞密度下促进细胞启动分裂。 PSKa表达受NAA诱导， PSKa表达同时细胞起动分裂。 水稻细胞质膜上存在PSKa的受体蛋白120kD和160kD 三、细胞分化 细胞分化（differentiation）：导致细胞形成不同结构，引起功能改变或潜在发育方式改变的过程（许智宏，1998）。 时间上的分化：一个细胞在不同的发育阶段上可以有不同的形态和机能 空间上的分化：同一种细胞后代，由于所处的环境（如部位）不同而可以有相异的形态和机能 单细胞生物：仅有时间上的分化 多细胞生物：时间上的分化，有空间上的分化，如一个植物个体在其顶端、根、茎、叶等不同部位具有不同的细胞。 1、细胞分化与基因组变化 染色体重复复制 DNA的差异扩增 基因重排 2．极性与细胞分化 极性：指植物的器官、组织、甚至单个细胞在不同的轴向上存在的某种形态结构以及生理生化上的梯度差异 极性无论在低等植物或高等植物中均普遍存在。 极性一旦建立，在一般情况下不可逆转。 在很多情况下，细胞的不均等分裂是细胞极性建立的标志。 3．激素在细胞分化中的调控作用 激素在植物生长发育中具有重要的调控作用，也是离体培养条件下调控细胞脱分化和再分化的主要因素。 生长素和细胞分裂素是两类主要的培养条件下调控细胞生长和分化的植物激素。 有些试验中也显示，GA3、ABA、乙烯等也在细胞分化中起到一定的调节作用。 第二节 器官发生 离体培养中器官发生的方式 器官分化过程 起始材料对器官分化的影响 激素对器官分化的调控 一、离体培养中器官发生的方式 三种方式： 先芽后根 先根后芽 愈伤组织的不同部位形成芽和根，再通过维管组织的联系形成完整植株。 二、器官分化过程 三个生长阶段： 诱导形成愈伤组织 “生长中心”形成：若干部位成丛出现类似形成层的细胞群，拟分生组织，它们是愈伤组织中形成器官的部位。 器官原基及器官形成 注意 在有些情况下，外植体不经过典型的愈伤组织即可形成器官原基。两种情况： 外植体中已存在器官原基，进一步培养即形成相应的组织器官进而再生植株，如茎尖、根尖分生组织培养； 外植体某些部位的细胞，在重新分裂后直接形成分生细胞团，然后由分生细胞团形成器官原基。 这种不经过愈伤组织直接发生器官的途径在以品种繁殖为目的的离体培养中具有重要的实践意义。 三、起始材料对器官分化的影响 母体植株的遗传基础：不同基因型器官分化能力不一样（玉米幼胚340、吉853、444，愈伤组织诱导率均为100%，器官分化率（％）78、11、0.4) 外植体的类型：体现在外植体的生理状态上。生理状态年轻，来源于生长活跃或生长潜力大的组织和器官的细胞更有利于培养 激素对器官分化的调控 生长素与细胞分裂素是两类主要的植物激素，在离体器官分化调控中占有主导地位。 生长素/细胞分裂素比例： 高：生根；低：分化芽；中：愈伤组织 光照对器官分化的影响基因调控 光照时间、强度以及光质对器官分化均有影响 同源框（homebox）基因： Kn1（KNOTTED1）；STM（Shootmeristemless） Cdc2；ESR1 bZIP（PKSF1）；SRD1、SRD2和SRD3 第三节 体细胞胚胎发生 体细胞胚概念：离体培养下没有经过受精过程，但经过了胚胎发育过程所形成的胚的类似物（不管培养的细胞是体细胞还是生殖细胞），统称为体细胞胚或胚状体。 体细胞胚是离体培养的产物 起源于非合子细胞，区别于合子胚； 经过了胚胎发育过程，区别与离体培中器官发生