中药对幽门螺杆菌的体外联合抗菌实验论文.docVIP

　　中药对幽门螺杆菌的体外联合抗菌实验论文 【摘要】 目的 研究黄连、乌梅、蜂胶对幽门螺杆菌的体外联合抗菌作用。方法 应用棋盘法，以琼脂平板法测定两两组合的不同浓度中药提取物对Hp的最低抑菌浓度，计算部分抑菌浓度(FIC)指数并判定联合效应。结果 黄连与蜂胶联合应用后，其FIC指数为0.13(＜0.5)；黄连与乌梅联合应用后，其FIC指数为0.75(＞0.5)；乌梅与蜂胶联合应用后，其FIC指数为0.19(＜0.5)。结论 黄连与蜂胶联合应用及乌梅与蜂胶联合应用，对Hp表现为协同作用，且乌梅与蜂胶联合应用协同作用较强；黄连与乌梅联合应用对Hp表现为相加作用；3种中药之间均无拮抗作用。 【关键词】 黄连 乌梅 蜂胶 幽门螺杆菌 联合抗菌实验 bined Antibacterial Activity of Three Chinese Drugs Against Helicobacter Pylori Abstract Objective：To study the bined antibacterial activity of Coptis chinensis.freel Fruit and Bee Propolispro against Helicobacter pylori(Hp)．Methods The protocol ethod．The MICs of Coptis chinensis，Dark Plum Fruit and Bee Propolispro alone or in tined by agar plate method,and the FIC indexes Fruit；The FIC index Fruit bined Fruit in bination ore potent synergistic action．Coptis chinensis bined Fruit Ceorgi had additivity against Hp．No antagonistic actions Fruit． Key Fruit；Bee Propolispro；Helicobacter pylori(Hp)；bined drug susceptibility test 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，Hp)是由arshall于1982年首次从慢性活动性胃炎患者胃窦黏膜活检组织中分离出来并培养成功的，目前认为该菌与慢性胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关淋巴样组织(MALT)恶性淋巴瘤以及肠型胃癌密切相关，inimal Inhibitory Concentration,MIC)，以部分抑菌浓度(Fractional Inhibitory Concentration,FIC)指数评价药物的体外联合抗菌效应，为研制抗Hp新的中药组方提供实验依据。 1 材料 1.1 Hp菌株 本研究采用的Hp菌株为国际统一的SS1(Sydney Strain1)菌株，经鉴定cagA(+)和VacA(+).由河北医科大学中医学院微生物室提供。 1.2 培养基［2］ 固体培养基为改良Skirrol改良Skirrog／L，万古霉素10 mg／L，多粘菌素B 2 500U／L，并加入50 ml脱纤维冻融兔血。改良Skirroin后，用文火煎熬30 min，倒出煎液，药渣再加等量蒸馏水煎熬30 min，2次煎液合并，3 500r／min离心15 min，倒出上清液，蒸发浓缩成含生药量1 g／mL浓度的药液。以最少量的二甲基亚砜溶剂溶解后，使其母液浓度分别为100 mg/mL、50 mg/mL、50 mg/mL. 2.2 菌液的制备 将培养3 d的Hp菌株用无菌生理盐水洗下后，配成布氏肉汤菌悬液，再用标准比浊管比浊，校正菌液浓度，使其菌液浓度相当于1×108(Colony Forming Units,CFU)/mL. 2.3 MIC的测定［3,4］ 将上述3种药物的母液以二甲基亚砜倍比稀释，得到以下7种浓度药液：黄连（100、50、25、12.5、6.25、3.13、1.57 mg/mL）、乌梅（50、25、12.5、6.25、3.13、1.57、0.78 mg/mL）、蜂胶（50、25、12.5、6.25、3.13、1.57、0.78 mg/mL）。按黄连+蜂胶、黄连+乌梅、乌梅+蜂胶3组药物两两配对，将每组配对药物的不同浓度药液按棋盘法设计，两两配比，每种中药液均加50 μL；再向每管中加入900 μL改良Skirroin，37℃培养72 h后观察结果。以肉眼及显微镜观察细菌生长情况，记录单独应用3种药的MIC甲药单用、MIC乙药单用，并选择最佳组合效应时联合2种药各自的MIC甲药联合、MIC乙药联