基因工程的基本操作程序第1课时.ppt

课堂练习 即时应用(随学随练，轻松夺冠) 4．(2009年高考浙江卷)下列关于基因工程的叙述，错误的是(　　) A．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物 B．限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶 C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性 D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达 D 6.下列属于获取目的基因的方法的是( ) ①利用mRNA反转录形成②从基因组文库中提取 ③从受体细胞中提取 ④利用PCR技术 ⑤利用DNA转录 ⑥人工化学合成 A.①②③⑤ B.①②⑤⑥ C.①②③④ D.①②④⑥ 7.在基因工程技术中，下列方法与目的基因获得无关的是 A.辐射诱变法 B.从基因文库中获取 C.反转录法 D.人工合成法 课堂练习 8.在基因工程中，把选出的目的基因（共1000个脱氧 核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸460 个），放入 PCR扩增仪中扩增4代，那么，在扩增仪中应放入 胞嘧啶脱氧核苷酸的个数是（ ） A．540 个 B．7560个 C．8100 个 D．17280 个 C 课堂练习 9.下列关于基因工程的说法中，正确的是( ) A．基因工程的设计和施工都是在细胞水平上进行的 B．目前基因工程所有的目的基因都是从供体细胞中 直接分离得到的 C．只要检测出受体细胞中含有目的基因，那么目的 基因一定能成功进行表达 D．基因工程能使科学家打破物种界限，定向改造 生物性状 D 课堂练习 10.基因工程中常用的受体细胞有细菌、真菌、____________。若将真核基因在原核细胞中表达，对该目的基因的基本要求是_________。 12.假设以大肠杆菌质粒作为运载体，并以同一种限制性内切酶切割运载体与目的基因，将切割后的运载体与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶。两两连接产物至少有_____种环状DNA分子，它们分别是_______________。 载体-载体连接物、 目的基因-目的基因连接物、 载体-目的基因连接物 动植物细胞 除去内含子 3 * * 思考？ 1个DNA分子进行PCR扩增,循环4次， 理论上至少共需要几个引物？ 2×（2n-1）(n为循环次数) （24-1）×2=30 本课时目标： 1.描述人工合成法，总结获的目的基因的三种方法 2说明基因表达载体构建过程、组成及各组件功能。 3说出三类受体细胞的转导方法。 方法3：人工合成法（真核生物） 反转录法 目的基因的信使RNA 目的基因 化学合成法 目的基因 DNA合成仪 推测 推测 单链DNA DNA聚合酶 思考：化学法合成的目的基因含内含子、启动子和终止子吗？ 肽链氨基酸序列 信使RNA序列 mRNA 基因的核苷酸序列 DNA 不含 获取目的基因的常用方法有哪些? （1）从基因文库中获取 （2）利用PCR技术扩增—目的基因序列已知 （3）人工合成法---目的基因不是很大且序列已知 目的基因的获取 反转录法 化学合成法 变性 复性 延伸 二、基因表达载体的构建 ——基因工程的核心 1 目的： 使目的基因在受体细胞中 ，并可以 给下一代，同时使目的基因能够 。 稳定存在 遗传 表达和发挥作用 科学家在培育抗虫棉时，经历了多次失败，才获得成功。起初把抗虫基因插入载体后导入棉花的受精卵中，结果抗虫基因在棉花内没表达。然后在重组质粒中插入启动子，棉花植株还是没有抗虫能力。科学家又在重组质粒中插入终止子，导入棉花受精卵，结果成长的植株，有了抗虫能力。 资 料: 质疑 从cDNA文库中获取的目的基因没有启动子，如果要实现目的基因导入受体生物中成功表达，基因表达载体需哪些元件？ 2.基因表达载体的组成： a、目的基因 b、启动子 c、终止子 d、标记基因 e、复制原点 基因的运载体、目的基因、启动子、终止子和 标记基因 等都是DNA片断，如何将它们连接起来？ 质粒 目的基因 限制酶 DNA连接酶 重组 DNA 3.基因表达载体的构建方法： 3.基因表达载体的构建过程 质粒 DNA分子 限制酶处理 两个切口 获得目的基因 DNA连接酶 重组DNA 同一种 一个切口 质粒中插入启动子、终止子和标记基因 等 也是同样的方法。 2.科学家已经能够通过基因工程的方法，能使番茄果肉细胞中含有人奶蛋白。以下有关该基因工程的叙述错误的是（ 　） A．采用反转录法得到的目的基因有启动子、终止子 B．用同种限制酶处理质粒和含目的基因的DNA，可产生相同的黏性末端而形成重组DNA分子 C．番茄的叶肉细胞可作为受体细胞 D．启动子对于目的基因在