响应面法优化水杨酸比色测定还原糖的研究.pdfVIP

2013 年8 月 中国粮油学报 Vo l. 28 ,No. 8 第28 卷第8 期 Journal of the Chinese Cereals and Oils Association Aug.2013 响应面法优化水杨酸比色测定还原糖的研究 朱凯杰陆国权张迟 (浙江农林大学农业与食品科学学院，临安 311300) 摘 要 首先分析与比较几种 DNS 配方测定还原糖的实用效果，然后再通过单因素和多因素试验，采用 响应面试验设计方法对最佳 DNS 配方进行了响应面优化，确定优化后的最佳 DNS 配方为:称取9.165 g DNS 溶于少量热蒸馆水中，溶解后加入 10% 氢氧化纳溶液426 mL，再加入 20 mL 丙三醇，摇匀，冷却后定容至 2 1 ∞o mL，贮于棕色试剂瓶中放直7 d 后使用。按照此配方制作标准曲线非常理想，其 R 0.9999 ，符 达到了 合要求，且实际测定结果，新配方比标配方测定的结果平均高约 2% ，也是符合要求的。 关键词 DNS 配方还原糖响应面分析优化 中固分类号:5 -3 文献标识码:A 文章编号:1003 -0174(2013)08 -0107 -07 DNS 比色法即3 ， 5 -二硝基水杨酸比色法的测 1 材料和方法 定原理是3 ， 5 一二硝基水杨酸在中性或偏碱性条件 1. 1 试剂 下与多糖水解的还原糖共热后被还原成棕红色的 3 ,5 -二硝基水扬酸(简称 DNS) 、氢氧化铀 氨基化合物一-3 -氨基 -5 一硝基水杨酸，在→定 (NaOH) 、酒石酸饵锅、苯酣:亚硫酸锅:丙三醇:上海 范围内，还原糖的量和反应液的颜色呈正比[1 -2) 。 试一化学试剂有限公司;0.1% 葡萄糖标准溶液(准 因此，可以通过测经比色后的分光光度值来测定还 确称取1∞ mg 分析纯的葡萄糖(预先在 105 t:干燥 原糖的量，从而间接测定作物中的淀粉含量。现 至恒重，用少量蒸馆水溶液后定容至 1∞ mL，冰箱保 今，由于此方法的实用性和准确性，已被广泛应用， 存使用) ;试验所用水为蒸馆水。 如刘华等[3) 对烟草中的淀粉含量的测定，陆国权 1. 2 仪器 等[4) 对甘薯中的淀粉含量的测定。但是应用过程 721 -分光光度计:南京凯迪高速分析仪器有限 中存在着各种 DNS 配方，且测定结果存在较大差 公司;ABI04 - S 标准型分析天平:上海台衡仪器仪 异[川]。因此，为满足各类作物中淀粉的测定，确 表有限公;HK135 热恒温水浴锅:杭州韩工科技有限 定→种既准确又方便、快速、经济的 DNS 比色法的 公司;容量瓶、滴定管、量筒、烧杯、棕色瓶:上海卫程 配方势在必行。 科学仪器有限公司;移液枪、1 mL 吸嘴:北京华汇通 本研究从准确性、实用性、方便性、快速性、经