合浦珠母贝iPS细胞相关的转录因子的克隆及分析.PDF

合浦珠母贝 iPS 细胞相关的转录因子的克隆及分析 张若云, 徐广锐, 潘 聪, 谢莉萍, 王洪钟, 张贵友, 张荣庆 ( , 100084) 摘要: 转录因子Sox2 、Oct4 、c-Myc 和KLF4 在iPS 细胞研究中具有重要作用, 将它们加入体外培养的 细胞中, 可以诱导体细胞去分化成为多能干细胞。作者通过 RACE-PCR 技术从合浦珠母贝(Pinctada fucata ) 的外套膜组织中克隆获得了3 个转录因子——c-Myc 、Sox2 及KLF4 的cDNA 。c-Myc 全长 1585bp, 开放阅读框的长度为 1131bp, 编码 376 个氨基酸, 蛋白结构分析表明它具有保守的 HLH 和 Myc-N 结 构域。Sox2 全长 1908bp, 开放阅读框长度为 990bp, 编码 329 个氨基酸, 蛋白结构分析它具有保守的 HMG-box 和 Soxp 结构域。KLF4 全长2268bp, 开放阅读框长624bp, 编码207 个氨基酸, 预测该蛋白 具有两个zf-H2C2_2 结构域。BLAST 分析它们均与太平洋牡蛎的相关蛋白具有较高同源性, 说明其与 太平洋牡蛎亲缘关系更近。RT-PCR 实验发现这3 个基因在合浦珠母贝外套膜、足、生殖腺、内脏团、 闭壳肌和鳃 6 种组织中均有表达, 表明它们是非常保守的转录因子。本研究对于合浦珠母贝细胞系建 立和研究具有启发意义。 关键词: 诱导多功能干细胞; 转录因子; 克隆; 合浦珠母贝(Pinctada fucata) 中图分类号: S823.3 文献标识码: A 文章编号: 1000-3096(2014)04-0007-08 doi: 10.11759/hykx20130922001 (embryonic stem cells, ESCs) , , , , Sox2 Nanog , [4-5] c-Myc , [1] (induced pluri- , c-Myc , potent stem cells, iPS cells)ESC , , c-Myc , , , [5-6] Sox2 , , , [5] , Sox2 (ES Yamanaka cell)(EC cell), 4 Sox2Oct4c-Myc KLF4 [7-9] , KLF4 , , , p21 iPS [1-2], iPS , , p21 , p53 [4]