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7. 典型的生长曲线 单细胞微生物在密闭状态液体培养基中群体变化规律 4个生长期 延滞期 指数期 稳定期 衰亡期 复习思考题 设计一张表格,比较一下微生物6类营养要素。 2. 设计表格,比较微生物的4大营养类型。 3. 设计表格,比较四种营养物质进入细胞的方式。 4. 对培养基的种类列表表示。 5.什么叫典型生长曲线?它可分几期?每个生长期的特点是什么? (一)恒浊连续培养 恒浊器(turbidostat)是一种根据培养器内微生物的生长密度,并借光电控制系统来控制培养液流速,以取得菌体密度高、生长速度恒定的微生物细胞的连续培养器。 测定所培养微生物的光密度值 自动调节新鲜培养基流入和培养物流出培养室的流速 使培养物维持在某一恒定浊度 当培养室中的浊度超过预期数值时,流速加快,使浊度降低; 当培养室中的浊度低于预期数值时,流速减慢,使浊度升高; 恒浊培养器的工作精度是由光电控制系统的灵敏度来决定的 如果所用培养基中有过量的必需营养物,就可以使菌体维持最高的生长速率。 一般用于菌体以及与菌体生长平行的代谢产物生产的发酵工业 (连续发酵) 连续发酵与单批发酵相比的优点: 缩短发酵周期,提高设备利用率; 便于自动控制; 降低动力消耗及体力劳动强度; 产品质量较稳定; 缺点:杂菌污染和菌种退化 (二)恒化连续培养 恒化器(chemostat或bactogen)是一种设法使培养液流速保持不变,并使微生物始终在低于其最高生长速率条件下进行生长繁殖的一种连续培养装置。它通过控制某一种营养物的浓度,使其始终成为生长限制因子的条件下达到的,因而可称为外控制式的连续培养装置。 使培养液流速保持不变,并使微生物始终在低于其最高 生长速率下进行生长繁殖。 恒化连续培养中,必需将某种必需的营养物质控制在较低的浓度, 以作为限制性因子,而其他营养物均过量。 (细菌的生长速率取决于限制性因子的浓度,并低于最高生长速率) 限制性因子必须是机体生长所必需的营养物质,如氨基酸和氨等氮源,或是葡萄糖、麦芽糖等碳源或者是无机盐,因而可在一定浓度范围内能决定该机体生长速率。 通过控制流速可以得到生长速率不同但密度基本恒定的培养物 多用于科研 遗传学:突变株分离; 生理学:不同条件下的代谢变化; 生态学:模拟自然营养条件建立实验模型; 对数生长期的细菌个体形态、化学组成和生理特性等均较一致,代谢旺盛、生长迅速、代时稳定,所以是研究微生物基本代谢及遗传特性的良好材料。它也常在生产上用作种子,使微生物发酵的迟缓期缩短,提高经济效益。 2. 对数生长期的3个重要参数 (1)繁殖代数(n) x2=x1·2? lgx2–lgx1 n = ———————— =3.322(lgx2–lgx1) lg2 (2)生长速率常数(R) n 3.322(lgx2–lgx1) R = ———————— = ———————————————— t2–t1 t2–t1 (3)代时(G) 1 t2–t1 G = ———— = ———————————————— R 3.322(lgx2–lgx1) 在细菌个体生长里,每个细菌分裂繁殖一代所需的时间为代时(Generation time); 在群体生长里细菌数量增加一倍所需的时间称为倍增时间(Doubling time)。 影响微生物增代时间(代时)的因素 ① 菌种,不同的微生物及微生物的不同菌株代时不同; ② 营养成分,在营养丰富的培养基中生长代时短,反之则长;(37℃,E.coli在牛奶12.5min,肉汤17.0min) ③ 营养物浓度,营养物的浓度可影响微生物的生长速率和生长总量 ,在一定范围内,生长速率与营养物浓度呈正比; 凡是处于较低浓度范围内,可影响生长速率的营养物成分,就称为生长限制因子(growyh-limited factor)。 ④ 培养温度,在一定范围,生长速率与培养温度呈正相关。 (三)稳定期( stationary phase) 又称恒定期或最高生长期。其特点是生长速率常数R等于0,即处于新繁殖的细胞数与衰亡的细胞数相等,或正生长与负生长相等的动态平衡之中。 稳定期 这时的菌体产量达到了最高点,而且菌体产量与营养物质的消耗间呈现出一定的比例关系,这一关系就是生长产量常数Y(或称生长得率,growth yield)
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