人工合成拟Smac融合多肽促低剂量丝裂霉素C诱导膀胱癌细胞凋亡的研究.pdfVIP

· 932 · Journal of Clinical Urology，Dec 2007．Vol 22，No 1 2 人工合成拟Smac融合多肽促低剂量丝裂霉素C 诱导膀胱癌细胞凋亡的研究 王竞 曾甫清 汪良 杜岳峰 廖贵益 [摘要] 目的：探讨人工合成拟Smac融合多肽(SmacN7)对低剂量丝裂霉素C(MMC)诱导的膀胱癌T 细 胞凋亡的促进作用。方法：运用固相多肽合成技术人工合成 SmacN7细胞可穿透性融合多肽，将 0．05mg／ml MMC诱导的膀胱癌T。 细胞与5O～500,ug／L的SmacN7融合多肽共同孵育4～48 h，采用Annexin—V荧光染色 技术检测肿瘤细胞凋亡情况；应用流式细胞术和MTT比色法检测诱导后Tz 细胞凋亡率、增殖抑制率与SmacN7 的时间和浓度的效应关系。结果：50~500,ug／L SmacN7作用4～48 h，肿瘤细胞出现典型的凋亡形态学改变，随 着 SmacN7浓度的增加或药物作用时间的延长，肿瘤细胞凋亡率也增加，12 h为 5．67 ～56．12 ，24 h为 14．54 ～65．24 ，48 h为31．48 ～87．23 ，同时细胞增殖抑制率出现明显增加，药物作用12 h、24 h、48 h后， 增殖抑制率分别为9．58 ～63．42 、28．94 ～72．3 、44．7 ～87．12 。结论：SmacN7能够有效地促进低剂 量MMC诱导的膀胱癌 T。 细胞凋亡，并具有时间和浓度依赖性，为膀胱肿瘤的生物治疗提供了新思路。 [关键词] 膀胱肿瘤；Smac蛋白；合成肽；凋亡 [中图分类号] R737．14 [文献标识码] A [文章编号] 1001—1420(2007)12-0932—03 Apoptosis improvement effect of a synthetic Smac-mimic peptide on bladder cancer cell line T24 with the induction of low-dosage 0f MMC WlANG Jing ZENG Fuqing WANG Liang DU Yuefeng LIAO Guiyi ( Department of Urology，Union Hospital，Tongji Medical College，Huazhong University of Science and Technology，Wuhan，430022，China) Abstract 0bjective：To study the apoptosis improvement effect of a synthetic Smac-mimic peptide(SmacN7) on bladder cancer cell line T24 with the induction of low—dosage of MMC．Methods：Penetrating SmacN7 was syn— thesized with aid of peptide solid phase synthesis technique．Bladder cancer cell line T“were incubated with differ— ent concentration of SmacN7(5O～500ug／L)for 4—48 h．The apoptosis was detected by Annexin-V fluorescence , staining．The relationship between the percentage of apoptosis and the time and concentration of SmacN7 was as— sayed by flow cytometry．The inhibitory ratio of cellular proliferation was evaluated by MTT assay．Re