以即时聚合酶链锁反应法进行荷兰乳牛短脊椎综合症 - 中国畜牧学会.PDF

中國畜牧學會會誌 46(1) ：13~30, 2017 13 以即時聚合酶鏈鎖反應法進行荷蘭乳牛短 脊椎綜合症基因檢測可行性探討及頻度調查 賴芳裕(1)(3) 陳怡璇(1)(2)(3) 凃柏安(1)(2) 蕭振文(2) 許佳憲(1) 林彤(1) 王佩華(1)(4) 摘要：乳牛短脊椎綜合症（brachyspina syndrome, BS ）為荷蘭乳牛體染色體隱性遺 傳致死性疾病，此隱性基因會導致荷蘭母牛懷孕之胎兒在發育的過程中，因脊椎 及臟器發育不良，造成流產或死產之重大經濟損失。本研究旨在以即時聚合酶鏈 鎖反應法建立荷蘭乳牛 BS 基因檢測平台，並藉由調查 BS 基因頻率，以瞭解臺灣 荷蘭乳牛群中該基因型頻率。試驗之荷蘭乳牛，分別為來自北部 7 場（樣本數分 別為 20 、56 、38 、31 、31 、53 及 144 頭）及南部 2 場（樣本數為 13 及 50 頭）， 共計 9 場乳牛場 436 頭血液樣品。試驗結果顯示，利用即時聚合酶鏈鎖反應法 （real-time PCR ）所建立的 BS 基因檢測平台與 PCR 檢測平台，檢測結果僅有 1 個 BS 基因雜合型個體的差異，此顯示本試驗所開發的即時聚合酶鏈鎖反應法與 PCR 檢測平台，兩者在整體檢測結果上並無差異存在（ 0.95 ）。另在所檢測的 9 個 乳牛場 436 頭荷蘭乳牛樣本，結果發現 BS 基因雜合型的檢出率為 3.23 ~ 23.08% ， 平均為 6.88% ；BS 基因正常型檢出率為 76.92 ~ 96.77% ，平均為 93.12% 。進一步 利用系譜資料追蹤分析，結果顯示，在所試驗的乳牛群其 BS 雜合基因型個體，約 有 41.1~50% 是由 BS 基因正常型種公牛冷凍精液分別與配原族群中 BS 基因雜合 型母牛所生，也就是子代所獲得的 BS 隱性交替基因，是由原族群中 BS 隱性交替 基因再傳遞下去，而非外來（進口）種公牛冷凍精液所引入族群中。因此，建議 未來當酪農在進行自家乳牛場 BS 基因型篩選時，除應避免選擇帶有 BS 隱性交替 基因種公牛的冷凍精液外，對於乳牛場內現有的繁殖種母牛群也應進行 BS 基因雜 合型個體篩選及淘汰，這樣才能將乳牛場內 BS 隱性交替基因的頻度降至最低或完 全清除，使 BS 隱性交替基因個體對於場內繁殖性能的影響降至最低，進而提升乳 牛場的繁殖性能，增加乳牛場的收益。 PCR) （關鍵語：短脊椎綜合症、基因型鑑定、荷蘭牛、即時 (1) 國立臺灣大學動物科學技術學系，10672 臺北市基隆路三段 155 巷 50 號。 (2) 行政院農業委員會畜產試驗所新竹分所。36843 苗栗縣西湖鄉五湖村埤頭面 207-5 號 。 (3) 兩者貢獻相同。 (4) 通訊作者，demonwang@.tw 14 緒　　言 荷蘭乳牛短脊椎綜合症（brachyspina syndrome, BS ）病例首見在 2006 年發現於丹麥（Ageholm et al., 2006 ），隨後荷蘭與丹麥（Agerholm and Peperkamp, 2007; Charlier et al., 2012 ）、義大利 （Testoni et al., 2008 ）、加拿大（Agerholm et al., 2010 ）、德國（Buck et al., 2010 ）、美國（VanRaden et al., 2011 ）及波蘭（Ru and Kami ski, 2015 ）陸續有荷蘭乳牛 BS 個案研究報導，當個體基因型 是致死性隱性純合型時，荷蘭乳牛個體的遺傳異常將導致個體早期流產（最常見）或死胎（少見）。 Test